主题：【每周讨论之3】本周话题：液相色谱流动相的选择条件/HPLC级试剂与其它种类（等级）试剂的区别

原文由 wangboxzzjs 发表:
基准试剂的纯度相当于或高于优级纯试剂。色谱纯试剂是在最高灵敏度下以10-10克下无杂质峰来表示的。光谱纯试剂是以光谱分析时出现的干扰谱线的数目及强度来衡量的，即其杂质含量用光谱分析法已测不出或杂质含量低于某一限度。有的试剂即使是分析纯，纯度也只有80%多。
    化学纯是指一般化学试验用的，有较少的杂质，不妨碍您的实验要求。分析纯是指做分析测定用的试剂，杂质更少，不妨碍分析测定。色谱纯是指进行色谱分析时使用的标准试剂，在色谱条件下只出现指定化合物的峰，不出现杂质峰。
    化学纯是指满足一般生产或分析试验的试剂纯度，分析纯的纯度要比化学纯要高，一般应用于要求比较苛刻的场所，如医院用的试剂。

要求给他加分。

泵─往复式恒流柱塞泵
三大问题：
    1. 单向伐故障：红宝石球与伐座密封不严。
    原因：⑴ 污染：气泡、微粒。
    解决方法：用25mL 水、甲醇、异丙醇、二氯甲烷 依次冲洗。在稀硝酸中超声15min ，用HPLC水洗2～3次、甲醇洗2次。
    ⑵ 磨损：对调红宝石球，使面密封变为线密封。
    2. 密封圈故障：渗漏、垫圈碎片污染系统。表现：压力不稳、泵头漏液。通常三个月或不定期换密封圈。拆泵头：兰宝石杆要缩至最短。
    3. 气泡：用脱气后甲醇冲洗。
予防措施：
    1. 用高质量溶剂和水作流动相。
    2. 流动相脱气。
    3.每天结束时：先用水洗，再用甲醇洗。若用过缓冲液：必须先水洗30～60min
（1ml/ min），再甲醇洗30min，千万不可先用甲醇冲洗，否则无机盐沉淀堵了管路。
    4. 及时换密封圈，加油。
    5. 用10mL水、10mL甲醇洗泵头排水孔。
    6. 防止柱塞杆磨损。换新圈仍漏，则是柱塞杆被盐划伤。
7.3.5 进样器

高纯度
平滑的紫外吸收曲线
低紫外吸收
低于或接近理论截止波长
低蒸发残留
低含水量

色谱纯、贵
优级纯、贵
光谱纯、贵
进口纯、更贵

色谱纯主要是在分析纯的基础上,进一步提纯,当然更重要是除杂,最终要求达到其要求的纯度.

以作实验的实际效果来说,我曾经用了北分分析纯的甲醇过滤后,使用,效果也还可以. 有一次去工厂,技术指导,用的是国内的一家色谱纯甲醇,滤膜抽滤,拿下滤膜吓了一跳,黑色的东西很明显的留在滤膜上,尽管价格40-60一瓶,500ML.

国外的merk用的不错,基本不需过滤就使用.

各位以后使用流动相,不仅要看纯度,还要看品牌.

说白了就是纯度问题

第一个问题太高深，就说说第二个吧

色谱纯或者农残纯度级别的试剂含杂量极微，可避免因试剂不纯而带入的杂峰和其他不可预知的污染，对于峰的判别、仪器故障分析和仪器保养有着重大意义

例如，分析纯的丙酮，含量99.5%，蒸发残渣 0.001，水分0.3，醛0.002，甲醇0.05，乙醇0.05（刚随便从手边一个瓶子上抄的）


随便在迪马的网上查的，我一般用的美国迪马的溶剂，据说要比FISHER和MECK要便宜一些。。。（听说，我都还从来没问过FISHER和MECK的价格呢）

HPLC级丙酮：
含量99.99%
水分小于0.38%
此外还有一些特征波长下的吸收值
· 高纯度
· 平滑的紫外吸收曲线
· 低紫外吸收
· 低于或接近理论截止波长
· 低蒸发残留
· 低含水量



而农残级的丙酮
含量99.98%，蒸发残渣小于3ppm，水分小于0.2%，
· 超过或达到ACS 标准
· 特殊纯化处理
· 对ECD 检测有响应的杂质含量被控制在ppt 水平
· 对FID 检测有响应的杂质含量被控制在ppb 水平
· 非常低的蒸发残留
· 适合所有GC/HPLC/ 光谱使用

这样的试剂对实验的影响自然远远小于分析纯的

分析纯的在要求不高的情况下也可使用，但是最好是能用色谱纯（HPLC）和农残级别的(P.R.)
嫌进口农残级或色谱纯试剂太贵，又需要准确进行实验分析的话，也可将分析纯的进行重蒸馏（使用石英玻璃蒸馏器，无明火加热方式，切切！！！注意蒸馏温度，刚好在该试剂沸点附近不超过沸点5度），并浓缩100倍后进样，验证试剂纯度，不要带入杂质就可以了。


但是我也有个问题，PR级别的说明里面说了也适合HPLC使用的.但是我刚才举例的就是PR的纯度只有3个9，而HPLC的纯度是4个9，农残级别的溶剂做HPLC好用么？（我就是一直买的PR试剂没买色谱纯的，PR大概比色谱纯的贵10-20%左右）

分析纯、色谱纯,是指试剂的纯度级别。分析纯是指做分析测定用的试剂，杂质更少，不妨碍分析测定。
色谱纯是指进行色谱分析时使用的标准试剂，在色谱条件下只出现指定化合物的峰，不出现杂质峰。
色谱纯的试剂杂质比分析纯的更少

原文由 sarlune 发表:
第一个问题太高深，就说说第二个吧

色谱纯或者农残纯度级别的试剂含杂量极微，可避免因试剂不纯而带入的杂峰和其他不可预知的污染，对于峰的判别、仪器故障分析和仪器保养有着重大意义

例如，分析纯的丙酮，含量99.5%，蒸发残渣 0.001，水分0.3，醛0.002，甲醇0.05，乙醇0.05（刚随便从手边一个瓶子上抄的）


随便在迪马的网上查的，我一般用的美国迪马的溶剂，据说要比FISHER和MECK要便宜一些。。。（听说，我都还从来没问过FISHER和MECK的价格呢）

HPLC级丙酮：
含量99.99%
水分小于0.38%
此外还有一些特征波长下的吸收值
· 高纯度
· 平滑的紫外吸收曲线
· 低紫外吸收
· 低于或接近理论截止波长
· 低蒸发残留
· 低含水量



而农残级的丙酮
含量99.98%，蒸发残渣小于3ppm，水分小于0.2%，
· 超过或达到ACS 标准
· 特殊纯化处理
· 对ECD 检测有响应的杂质含量被控制在ppt 水平
· 对FID 检测有响应的杂质含量被控制在ppb 水平
· 非常低的蒸发残留
· 适合所有GC/HPLC/ 光谱使用

这样的试剂对实验的影响自然远远小于分析纯的

分析纯的在要求不高的情况下也可使用，但是最好是能用色谱纯（HPLC）和农残级别的(P.R.)
嫌进口农残级或色谱纯试剂太贵，又需要准确进行实验分析的话，也可将分析纯的进行重蒸馏（使用石英玻璃蒸馏器，无明火加热方式，切切！！！注意蒸馏温度，刚好在该试剂沸点附近不超过沸点5度），并浓缩100倍后进样，验证试剂纯度，不要带入杂质就可以了。


但是我也有个问题，PR级别的说明里面说了也适合HPLC使用的.但是我刚才举例的就是PR的纯度只有3个9，而HPLC的纯度是4个9，农残级别的溶剂做HPLC好用么？（我就是一直买的PR试剂没买色谱纯的，PR大概比色谱纯的贵10-20%左右）

资料挺好的呵呵。
需要说明的是，HPLC级的试剂，对含量的要求并不一定很高，而是对不同波长（段）的紫外吸收以及含有的固体颗粒有较高的要求。所以你说的HPLC级的纯度要有4个9，这个不一定的，看到过很多3个9甚至更低纯度的。
而农残级的要求又不同，主要对杂质有更高的要求。能不能做HPLC需要试验确定，一般应该是可以的。
同样的，还有光谱纯等，前面已经有版友说过了。