主题:【求助】如何自己填色谱柱子和冲洗柱子

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原文由 glory143 发表:
恩,有了结果我肯定会告诉大家的,经验要共享

如果柱子几天不用的话,用甲醇+乙氰+水保存柱子,与用100%乙氰保存相比,对柱子的寿命影响会不会很大?


我赞成你,加油!
付振江
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建议还是买个新的,因为自己挖掉进口部分填料,会造成基线不稳,同时因为我们不是专业的,自己填充进去的填料效果也不太好
天空之城
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个人感觉如果填料不同,对结果分析也会有影响的,且使用时柱子的损耗肯定比较大
leywi
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我个人的想法:
    1.你可以试着打个电话到Agilent公司或查看色谱柱使用说明书,看看此类柱子能不能反冲!反冲色谱柱也可以有效的清洗出柱子的污染物!
    2.如果要挖去脏的部分,重新补上同类型的填料(ODS XDB-C18)的话,最好的方法是:用同样类型的旧柱子填料(补上之前要使用异丙醇等有机溶剂润湿一会,然后再填一点,抹平,慢慢来)。
    3.重新填好后,应该先用5%的甲醇清洗柱子1小时左右,再用95%的甲醇清洗30分钟,接着用异丙醇来清洗60分钟,以此来活化柱子!
    4.你做完实验后,应该先用5%的甲醇(以此来清洗掉柱子里的缓冲盐)清洗柱子1小时左右,然后用50%的甲醇过渡15分钟左右,最后用95%的甲醇清洗30分钟,便完成了色谱柱的保存。
    5.个人建议你:在色谱柱前加一预柱或者保护柱,这样能有效的保护柱子,这也是一种很经济的方法!
gary720168
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xuzheng0320
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就冲洗时间来说,我认为用大水相冲洗的时间可以再长些,保证柱子里的盐能冲洗完全。
柱子可以补一下柱头,肯定是要用相同调料的,可以考虑挖相同柱形的已经报废的柱子,填柱头时要注意平整,填好后先用有机相慢慢冲,再测柱效。
glory143
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cindy_wang_0606
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一般仪器商都不销售成装柱的填料,旧柱挖来的填料不好说啊,柱子一旦打开,柱效肯定不好了,干脆换新的
轩辕义
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原文由 glory143(glory143) 发表:
做氨基酸分析,我用的Agilent的ODS XDB-C18柱子,柱子用久了比较脏了,想把柱头挖了,再自己补上,但是不知道用什么填料好,也不知道具体怎么操作,因为第一次弄,各位高手有什么好的建议啊
流动相中,A相是缓冲盐,每次上机完以后,先用70%水+30%C相(C相主要是甲醇和乙氰,还有少量水)冲洗15分钟,然后逐渐过度到100%C相,整个冲洗过程在1小时左右,这样冲洗有问题吗?感觉柱效降的比较快,做400个样柱子就不行了
哥们  你的方法可以借鉴一下吗?我遇到很多问题  求指教啊
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