主题:【求助】请问大家插样品杆以及开灯丝的条件是什么?另外问几个JEOL 1400 和SIS CCD的问题

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lzhwin1984
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新手初来,感谢大家关心
先说一下我们院的电镜:JEOL 1400  120KV 高反差生物电镜  配冷阱  CCD为SIS CANTEGA G2  2K×2K(底装)有几个问题请教大家:

1、工程师说插样品杆时要等PIG4(样品室真空规)读数在35以下(正常40以下绿灯会亮)再转进镜筒,由于南方天气潮湿(不知道是不是这个原因)一般需要重复开关一次PUMP开关才能抽到这个数值,大概要一分半钟。然后要求PIG4读数在30以下的时候开灯丝,前几周大概要10分钟才能达到要求。对于生物样品,这么长的换样时间是无法忍受的。请问大家一般是什么标准?我发现一般5分钟后枪室的PEG读数就可以降到20以下。

2、前两天发生了一次严重的误操作:升高压的过程中随手开了LENS 结果全电镜紧急停机,请问有什么影响?再开机我是发现抽真空没以前那么快了。

3、请问有没有人用过JEOL 的五头样品杆?用起来方便吗?容不容易坏?

4、大家用CCD拍照的时候一般条件是什么(主要是亮度),拍出来的图片一般怎么做处理(一般都会发蒙吧?怎么增加反差?)?

5、请问有人用过侧插SIS morada CCD(别敲我啊
)吗?觉得效果好差啊?总觉得不清楚,而且看不到那个调像散的FFT环。难道是底装CCD用多了?

6、近来发现样品室即使插样品杆抽一夜PIG4读数也只有28多一点,而枪室PIG2读数居然是27此时(PEG读数15左右),工程师说正常所有PIG规应该都是25.请问是怎么回事?是镜筒漏气真空抽不上来,还是真空规读数漂移呢?之前测过真空泄漏率很正常,但是现在读数比测的时候又高了将近2,真是很担心啊。

问了这么多,感谢大家了!
推荐答案:tianyayouke回复于2008/10/06
我现在用的是JEM-1400和GATAN 792侧插入式CCD。
1400的样品加入没有那么高的要求,不过一定要保证样品充分干燥才行。的确是存在真空规漂移问题,我们的真空对应的读书越来越高,厂家工程师建议定期校正真空规,当然要它们才能完成。
CCD所取图像的质量虽然与CCD的性能有关,但对应生物样品,最大的影响因素还是样品本身的问题:标本的厚度,染色的质量、何种样品(实体组织还是培养细胞的)等,归根到底是要有合格的超薄切片!
792CCD采集图像时已经自动做了图像处理,我们经常认为所得图像反差太强,不利于细节观察。
我所知道的就这些,欢迎经常交流。
补充答案:

hand回复于2008/10/08


首先日本电子的电镜真空本身就比较差,为了节约成本他们的电镜用的泵不够,如果真空泄漏率正常,你调一下读数吧,PIG过一段时间会漂移的,我们的也有这样的问题。
至于CCD,我觉得你说的图像不清楚可能和你的样品有关系,我觉得SIS的CCD还可以吧,我们也是G2,记得拍照的时候尽量用短的曝光时间,设置16位图像就可以增加反差了。
侧插CCD就不是用来拍高分辨的,当然看不到FFT,消物镜像散要用底插消。

黑洞回复于2008/10/13

定期烘烤以下电镜吧!

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tianyayouke
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我现在用的是JEM-1400和GATAN 792侧插入式CCD。
1400的样品加入没有那么高的要求,不过一定要保证样品充分干燥才行。的确是存在真空规漂移问题,我们的真空对应的读书越来越高,厂家工程师建议定期校正真空规,当然要它们才能完成。
CCD所取图像的质量虽然与CCD的性能有关,但对应生物样品,最大的影响因素还是样品本身的问题:标本的厚度,染色的质量、何种样品(实体组织还是培养细胞的)等,归根到底是要有合格的超薄切片!
792CCD采集图像时已经自动做了图像处理,我们经常认为所得图像反差太强,不利于细节观察。
我所知道的就这些,欢迎经常交流。
hand
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原文由 lzhwin1984 发表:
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1、工程师说插样品杆时要等PIG4(样品室真空规)读数在35以下(正常40以下绿灯会亮)再转进镜筒,由于南方天气潮湿(不知道是不是这个原因)一般需要重复开关一次PUMP开关才能抽到这个数值,大概要一分半钟。然后要求PIG4读数在30以下的时候开灯丝,前几周大概要10分钟才能达到要求。对于生物样品,这么长的换样时间是无法忍受的。请问大家一般是什么标准?我发现一般5分钟后枪室的PEG读数就可以降到20以下。

2、前两天发生了一次严重的误操作:升高压的过程中随手开了LENS 结果全电镜紧急停机,请问有什么影响?再开机我是发现抽真空没以前那么快了。

3、请问有没有人用过JEOL 的五头样品杆?用起来方便吗?容不容易坏?

4、大家用CCD拍照的时候一般条件是什么(主要是亮度),拍出来的图片一般怎么做处理(一般都会发蒙吧?怎么增加反差?)?

5、请问有人用过侧插SIS morada CCD(别敲我啊
)吗?觉得效果好差啊?总觉得不清楚,而且看不到那个调像散的FFT环。难道是底装CCD用多了?

6、近来发现样品室即使插样品杆抽一夜PIG4读数也只有28多一点,而枪室PIG2读数居然是27此时(PEG读数15左右),工程师说正常所有PIG规应该都是25.请问是怎么回事?是镜筒漏气真空抽不上来,还是真空规读数漂移呢?之前测过真空泄漏率很正常,但是现在读数比测的时候又高了将近2,真是很担心啊。

问了这么多,感谢大家了!

首先日本电子的电镜真空本身就比较差,为了节约成本他们的电镜用的泵不够,如果真空泄漏率正常,你调一下读数吧,PIG过一段时间会漂移的,我们的也有这样的问题。
至于CCD,我觉得你说的图像不清楚可能和你的样品有关系,我觉得SIS的CCD还可以吧,我们也是G2,记得拍照的时候尽量用短的曝光时间,设置16位图像就可以增加反差了。
侧插CCD就不是用来拍高分辨的,当然看不到FFT,消物镜像散要用底插消。
黑洞
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pig的值是存在漂移,自己调调吧,但一般没有过30也不会有太大影响,这个值只定性不定量。
5头样品杆相对于单头样品杆在更换样品的方面方便了很多,但它的漂移要比单头的大,所以它只适合于对于倍数要求不高而且更换样品频繁的用户,像生物方面的。
黑洞
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