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液相色谱（LC）

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主题：【求助】做硫酸软骨素峰面积越打越高

浏览0 回复5 电梯直达

zhenhua1229

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发表于：2008/09/09 22:16:38 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请问哪位大虾知道为什么我做硫酸软骨素的时候峰面积会一针比一针高,平时都要打10几针甚至一天才能两针平行,麻烦高手指教下出现这样情况的原因可能有哪些?
附:
流动相用的是乙腈:水=1:9
其中水是1.2g辛烷黄酸钠,1ml三乙氨,1ml磷酸到1000ml定容.
柱子:安捷伦的ZOBAX SB-C18 4.6*200mm
流速:0.8ml/min 温度:40
样品是用水溶解的.

高手千万要赐教啊!!

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2008/9/9 22:25:37 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

与三乙胺有关，这种物质吸附力很强，试着换成氨水，或者降低量到1滴，另外，尽力不用使用无机酸及盐做流动相。

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zhenhua1229

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2008/9/9 22:43:19 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢指点``

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zhenhua1229

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2008/9/9 22:48:09 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

再附上一句，我们经常用磷酸调流动相的pH，您说尽量少用无机酸能解释下为什么吗？呵呵我刚毕业做液相懂的少不要笑我：）～

能指教下用甲酸，乙酸，磷酸等等有什么区别以及要注意些什么？先谢过了！

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nnsss

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2008/9/10 12:24:43 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 zhenhua1229 发表:
请问哪位大虾知道为什么我做硫酸软骨素的时候峰面积会一针比一针高,平时都要打10几针甚至一天才能两针平行,麻烦高手指教下出现这样情况的原因可能有哪些?
附:
流动相用的是乙腈:水=1:9
其中水是1.2g辛烷黄酸钠,1ml三乙氨,1ml磷酸到1000ml定容.
柱子:安捷伦的ZOBAX SB-C18 4.6*200mm
流速:0.8ml/min 温度:40
样品是用水溶解的.

高手千万要赐教啊!!

硫酸软骨素在反相体系下保留很弱.水相比例很高,所以很难做重现,建议你挑选更合适的柱子!

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