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主题：【求助】细菌样品的制备方法

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neuzhang
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发表于：2008/11/09 16:49:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 已解决
求细菌样品的制备方法.
注:本人接触电镜刚一个星期,新手,求高手分享细菌样品制样的方法和经验!
先谢了!
推荐答案：阿朗回复于2008/11/11
悬浮状细菌样品需要先离心清洗，沉降在有膜的盖玻片上，戊二醛、锇酸固定，梯度乙醇脱水，干燥处理再喷金观察。如果是培养的爬片，直接清洗固定脱水干燥处理，喷金后就可以观察了。处理过程中需要注意的是：样品一定要清洗干净，避免培养液覆盖在细菌表面影响观察效果，可以用生理盐水或者PBS清洗；可以选用Formar膜（制备相对复杂，但沉降效果较好），也可以用镀金膜的盖玻片（制备方便，沉降效果一般）；沉降时间要适度，太短的话沉降的细菌较少，贴附也不紧密，时间太长的话细菌形态会受影响；再有就是在戊二醛固定过程中可以把盖玻片轻轻左右晃动几次，使之分布均匀，以避免沉降的细菌团聚在一起；在脱水干燥过程中应尽量避免脱水剂对盖玻片的直接冲击，可从周围贴壁加入脱水剂。
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2008/11/11 11:27:49 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬浮状细菌样品需要先离心清洗，沉降在有膜的盖玻片上，戊二醛、锇酸固定，梯度乙醇脱水，干燥处理再喷金观察。如果是培养的爬片，直接清洗固定脱水干燥处理，喷金后就可以观察了。处理过程中需要注意的是：样品一定要清洗干净，避免培养液覆盖在细菌表面影响观察效果，可以用生理盐水或者PBS清洗；可以选用Formar膜（制备相对复杂，但沉降效果较好），也可以用镀金膜的盖玻片（制备方便，沉降效果一般）；沉降时间要适度，太短的话沉降的细菌较少，贴附也不紧密，时间太长的话细菌形态会受影响；再有就是在戊二醛固定过程中可以把盖玻片轻轻左右晃动几次，使之分布均匀，以避免沉降的细菌团聚在一起；在脱水干燥过程中应尽量避免脱水剂对盖玻片的直接冲击，可从周围贴壁加入脱水剂。
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