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液相色谱（LC）

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主题：【原创】闲侃色谱[欢迎大家一起进来侃、侃、侃]

浏览0 回复81 电梯直达

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儒雅凤

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2009/7/11 9:54:57 61楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱法是俄国植物学家茨维特于1906年首先系统地提出来的。他在研究植物叶色素成分时,使用了一根竖直的玻璃管,管内充填碳酸钙,然后将植物叶的石油醚浸取液由柱顶端加入,并继续用纯石油醚淋洗。因植物叶不同色素在柱内得到分离而形成不同颜色的谱带,茨维特称这种分离方法为“色谱法”。在这一方法中把玻璃管叫作"色谱柱"，碳酸钙叫作"固定相"，纯净的石油醚叫作"流动相"。把茨维特开创的方法叫液固色谱法

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儒雅凤

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2009/7/11 10:04:46 62楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱原型装置，如图。

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〓猪哥哥〓

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2009/7/11 21:52:36 63楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

王子好久没更新了？

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happy王子矜

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2009/7/13 10:57:35 64楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

今晚来更新，前几天胃疼，今天好了一些了。

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sunny_chenxin

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2009/7/13 16:18:42 65楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wangzijin 发表:
胃疼了几天了，难受。

车票不好买，上火。

天气热，喝点菊花茶吧。注意身体啊

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happy王子矜

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2009/7/13 22:08:20 66楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

今天我们来说说色谱发展到现在跟以前有什么不一样，进步体现在什么地方。

先说液相，今天我们常用的高效液相跟次维特的液相看起来完全不一样了，次维特的液相是无电化操作，非常节约能源（环保问题就算了，有机试剂咱不说这个）。现在的液相没电你就别玩。

首先，色谱的核心——街道，现在有了大幅度的提高，你可以理解为次维特的那个手工填的大柱子是我们家村头那个政治经济文化中心（村委会、村集市、村最高学府XX小学所在地），而现代化工艺机器填装的柱子就是大上海的南京路步行街。对于我个人历史情感来说，村头的政治经济文化中心比南京路重要的多了，但是现实往往跟个人情感格格不入。

然后你会发现，多了一些东西出来。首先我们介绍新成员：泵。色谱之父次维特大爷是没这个先进东西的，他只是把混合的溶液倒了进去，靠着万有引力引起的地球重力，流动相和样品慢慢的往下流动，达到了分离。现在的分离要求高的多了，我们现在分离的大多是性质相差很小的，还靠原始的重力，大概要几个月才能分离开两个小样品。所以就有了输液泵这个东西的出现，它以很高的压力推着流动相走，大大提高了效率。所以高效液相以前就叫高压液相。因为这个高压的原因，会有很多要注意的地方，我们后面会一点点说到。

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2009/7/13 22:23:30 67楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

然后，就是检测器外加处理机。

次维特的液相检测器就是他的近视（也可能是远视）眼以及眼镜片。现代检测器构造复杂的多了。

次维特检测器的原理是，太阳光（那时候电灯没普及吧）打到色谱柱上，样品色素因为发光基团的存在，反射了青色绿色或黄绿色红色的光，光通过镜片折射到眼睛，我们就看到了明显的色带。现在用的检测器根据不同的种类有不同的原理。拿最常见的紫外检测器来说，根据的是朗伯比尔定律。说的是在低浓度情况下，某个特定波长下，某物质在溶液里面的浓度跟吸光度成正比。——继续胃疼，我跳过这一段了。

检测器有一个检测池，分离后的样品跟流动相的混合物通过的时候，有样品的那一小段会让检测池的吸光度跟空白对比池有很大区别，由此就有了信号的输出，不过我们肉眼看不到的。检测器把这些光信号转化为了电信号，输入给处理机（现在一般是工作站），连接在电脑上，我们就看到了色谱图了。

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