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主题：【求助】HPLC定量测定单糖

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junjun840326
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发表于：2009/07/25 09:50:47 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我要用HPLC测定样品中的木糖和阿拉伯糖。先前是使用PMP的柱前衍生化，利用紫外检测器检测，可是跑标样时，单糖总是出现两个峰，五分钟左右一个，35分钟左右一个，这是什么原因呢？如果我改用示差折光检测器测定，改用什么柱子比较好，流动相用什么呢？请各位高手指点一二！谢谢！
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2009/7/25 10:26:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 junjun840326 发表:
我要用HPLC测定样品中的木糖和阿拉伯糖。先前是使用PMP的柱前衍生化，利用紫外检测器检测，可是跑标样时，单糖总是出现两个峰，五分钟左右一个，35分钟左右一个，这是什么原因呢？如果我改用示差折光检测器测定，改用什么柱子比较好，流动相用什么呢？请各位高手指点一二！谢谢！


测糖的话，用氨基柱就可以啊，RI检测。或者选择凝胶柱也行
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watericecat
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2009/7/25 10:52:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有测糖用的专用柱，效果很好。
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2009/7/25 11:48:37 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
光有木糖/阿拉伯糖,用氨基柱就可以了,如果组分复杂,就要用离子交换的糖柱了
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hgycook
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2009/7/25 12:07:58 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们用的是磺酸基苯乙烯二苯乙烯 阳离子交换柱（H）
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Last edit by hgycook
richies
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2009/7/26 15:41:14 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
H柱和Na柱都可以做的,不过能用氨基柱做最好不过了
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junjun840326
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2009/7/28 9:21:21 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们现有的NH2柱没法分离木糖和阿拉伯糖，是不是因为柱子时间太久了啊？新的就一定能分离这两种单糖吗？
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junjun840326
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2009/7/29 9:34:47 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 richies 发表:
H柱和Na柱都可以做的,不过能用氨基柱做最好不过了


我们现有的NH2柱没法分离木糖和阿拉伯糖，是不是因为柱子时间太久了啊？新的就一定能分离这两种单糖吗？
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richies
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2009/7/29 10:52:59 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果氨基柱分不开,那只能用糖柱了

我在Agilent手册上查到了木糖和阿拉伯糖是用GC分析的
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yanrongzhe
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2009/7/29 13:31:35 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以使用离子交换色谱柱，Ca型和Pb型均可，纯化水做流动相就行，用示差折光检测器。
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junjun840326
junjun840326
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2009/7/30 11:50:58 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yanrongzhe 发表:
可以使用离子交换色谱柱，Ca型和Pb型均可，纯化水做流动相就行，用示差折光检测器。

确定一定能分开木糖和阿拉伯糖吗？因为这两种糖好像很难分离。
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