主题:【求助】在C4和C18都没有保留的蛋白质,求高手帮忙分析下

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palmT5
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分子量大于4000的,用普通柱子很难做,跟本冲不出来。
  只能用专用的柱子。
蚊 子
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yuan_log
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原文由 microlabzfy 发表:
分子量大于4000的,用普通柱子很难做,跟本冲不出来。
  只能用专用的柱子。

什么是专用柱子呀?偶好像做蛋白什么的,销售的都是用300A把偶打发了
蚊 子
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原文由 wsad8008 发表:
原文由 wenshaowei-2008 发表:
原文由 yuan_log 发表:
原文由 wenshaowei-2008 发表:
用氨基柱或者氰基柱试试
流动相换成正己烷和水
在使用之前,要用甲醇清洗管路过渡的

弱弱的问专家两个问题:正己烷与水能放在一起做流动相吗?互溶吗?一个非极性一个强极性 反相与正相过度是不是用异丙醇吧?


期待专家回答改问题,谢谢!
prefers
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蛋白质离子化程度那么高,在反相柱上的效果肯定是一般了.再说正相柱,道理上可以,可实际中哪里去找高纯度的正己烷?
楼主何不用一下HILIC柱子?专为亲水物质设计,蛋白质肯定没问题的.
yuan_log
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原文由 prefers 发表:
蛋白质离子化程度那么高,在反相柱上的效果肯定是一般了.再说正相柱,道理上可以,可实际中哪里去找高纯度的正己烷?
楼主何不用一下HILIC柱子?专为亲水物质设计,蛋白质肯定没问题的.

能不能详细介绍下HILIC柱子的性能,偶都不知道那是公司还是商品名
keiven
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你的是疏水性态强的样品,所以没有保留,这个在多台纯化公司经常用到。推荐换正相柱子或者聚合物柱子,用强酸流动相走走看看,还有用上海同田的逆流色谱或许会解决你的问题。
prefers
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原文由 yuan_log 发表:
原文由 prefers 发表:
蛋白质离子化程度那么高,在反相柱上的效果肯定是一般了.再说正相柱,道理上可以,可实际中哪里去找高纯度的正己烷?
楼主何不用一下HILIC柱子?专为亲水物质设计,蛋白质肯定没问题的.

能不能详细介绍下HILIC柱子的性能,偶都不知道那是公司还是商品名

应该是一种色谱模式吧,好多仪器公司都有这种色谱柱了,比较有名的是MERCK的了(不是广告哦)。具体哪种规格就需要问问相关方面工程师了。
www.mercksequant.com
c02405
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原文由 wenshaowei-2008 发表:
原文由 yuan_log 发表:
原文由 wenshaowei-2008 发表:
什么蛋白质的极性这么强啊?
换正相看看

还没用过正相呢,老大能不能给点提示,好比用什么样的柱子什么样的流动相
另外蛋白是我们这边设计的一种乙肝核心抗原,据说是有几个强极性区域的。

用氨基柱或者氰基柱试试
流动相换成正己烷和水
在使用之前,要用甲醇清洗管路过渡的



应该用异丙醇过渡吧,甲醇和正己烷不互溶,会出问题的
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