主题：【求助】用高效液相检测PAHs，为何检测不到任何波？

各位老师，各位前辈：
急切向各位求教：为何我用高效液相荧光检测器来检测多环芳烃，却检测不出任何波。我上机用的样品是PAHs标准混合样。
条件设置如下：
Agilent1100 高效液相色谱系统（HPLC）
色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18硅胶，柱长250mm，内径4.6mm
柱温：35℃
流动相：甲醇、水
流动相流速：0.5mL/min
梯度洗脱条件及荧光检测波长编程如下表1~2：
表1 流动相的梯度洗脱条件
Time(min)        Methanol(%)        H2O(%)
0.00        70.0        30.0
20.00        80.0        20.0
33.00        84.0        16.0
40.00        90.0        10.0
50.00        100.0        0.0

表2 荧光检测器波长编程
Time        Excitation(nm)        Emission(nm)        PMT-Gain
0.00        221        337        10
13.00        291        365        10
17.30        250        400        10
20.50        289        462        10
23.00        270        390        10
27.00        254        390        10
35.00        266        415        10
41.00        290        430        10
到底是哪里出了问题？后面改用了紫外检测器，能检到波，但分离效果不佳。请教各位我前面的方法到底出了什么问题，还有就是大家有没有好方法提供阿？
如果能有好的方法提供，将万分感谢阿！