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主题：【讨论】使用带缓冲盐的流动相前后该注意的事项！

浏览0 回复6 电梯直达
penglin1984
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发表于：2010/02/05 12:28:57 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
朋友们，为了分析的需要，我们有时会在流动相里增加很小比例的缓冲液，如磷酸缓冲盐之类的。对于带盐的流动相，试验前后对于色谱柱的处理，大家的意见如何？我是这样做的：每次做完试验，冲完柱子后，都是用100%的甲醇或乙腈将色谱柱保存起来。试验分析要用带有磷酸缓冲液的流动相，如乙腈：磷酸缓冲液=30：70，开机后先用不带盐的流动相如甲醇：水=5：95冲洗，先把纯甲醇试剂替换出来，大概20min左右，把流动相换成试验用的带磷酸缓冲液的流动相，平衡色谱柱，待基线平稳后再进样。每进完一针，走一下基线，平衡后再进针。所有分析结束后，先用不带盐的流动相(甲醇：水=5：95)冲洗60min，再用纯甲醇冲洗30min，再保存。不知道大家的意见如何？谢谢！
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2010/2/5 12:42:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
差不多就这样子吧，反正要把盐分给冲洗干净！！这个很重要！
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宁夏恋冰
quan0107yan1025
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2010/2/5 12:52:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该这样吧，我们也是这样做！不过样品不同，有时候冲的时间很长压力也降不到最初状态！
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楚无伤
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2010/2/5 13:34:06 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
差不多就是这样
反正原则是把盐冲洗出来
最后的冲洗流程建议甲醇：水=5：95冲洗15min，然后走梯度20min直到全部置换成甲醇，保持5min关机。
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hpy3965
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2010/2/5 13:50:36 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果  你的柱子 可以耐受全水相 可以用100水 冲 会更好 时间更短
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天天洗碗
binglang1985
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2010/2/8 12:52:17 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多冲一会对柱子寿命是有好处的，100水和甲醇：水=5：95冲洗区别很大吗？是不是太过小心了
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kila
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2010/2/14 22:57:10 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我可以很负责任地告诉你，我用磷酸盐缓冲液/乙腈/纯水（固定20%v/v）体系，和急变梯度，很快就损坏了一根柱子（每个色谱峰后出肩峰）。
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