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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】什么才是真正的超高效液相色谱系统，几家ＵＰＬＣ参数对比！

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有水有渝
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发表于：2010/05/06 22:23:37 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

超高效液相色谱UPLC®简介



UPLC原理基础

随着科学技术的进步，液相色谱用户对液相色谱技术的要求也不断提高，他们需要“更快地得到更好的结果"。因此超高效液相色谱（UltraPerformance LC®）概念的提出也就十分自然；简单的说：UPLC是用HPLC的极限作为自己的起点，把分离科学推向一个新领域。

沃特世公司引入UPLC的概念是由研究著名的van Deemter 方程式及其曲线开始。

由van Deemter曲线可以得到以下几点启示:

首先,颗粒度越小柱效越高；其次,不同的颗粒度有各自最佳柱效的流速；最后，更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速（线速度）方向移动，而且有更宽的线速度范围。所以降低颗粒度不但能提高柱效，同时还能提高分析速度。

使用更高的流速会受到色谱柱填料耐压及仪器耐压的限制。反之；如果不用到最佳流速，小颗粒度填料的高柱效就无法体现。

此外；更高的柱效需要更小的系统体积（死体积）、更快的检测速度等一系列条件的支持，否则小颗粒度填料的高柱效同样无法充分体现。

因此；要真正创建一个全新的分离科学领域 － UPLC，必须解决以下几个问题：

1. 大幅度提高色谱柱的性能:第一要解决小颗粒填料的耐压问题，第二要解决小颗粒填料的装填问题，包括颗粒度的分布以及色谱柱的结构。

2. 高压溶剂输送单元（超过15,000psi）

3. 完善的系统整体性设计，降低整个系统的体积，特别是死体积,并解决超高压下的耐压及渗漏问题。

4. 快速自动进样器，降低进样的交叉污染

5. 高速检测器；优化流动池以解决高速检测及扩散问题

6. 系统控制及数据管理，解决高速数据的采集、仪器的控制问题

新型的色谱填料及装填技术

UPLC分离只有在新型的、耐压而且颗粒度分布范围很窄的1.7µm颗粒填料合成出来之后才有可能实现。

色谱柱技术应该涵盖几个方面的内容：首先是填料的合成，以得到高质量的填料颗粒，包括：耐高压、耐酸碱等等。其次是颗粒的筛选，选出颗粒度分布尽可能窄的填料。最后是装填技术，以保证既能堵住颗粒不使其外流，又不至于引起反压的大幅升高。

沃特世公司的ACQUITY UPLC® BEH色谱柱使用了更严格的筛分技术,使1.7µm填料的分布很窄，并且使用了全新筛板（专利申请中）及其它色谱柱硬件（柱管及其连接件），在超过20,000psi的压力下装填。沃特世公司为此安装了一条新的色谱柱装填生产线及新的测试设备。因此；ACQUITY UPLC色谱柱的性能及质量比目前的HPLC柱有了质的飞跃。

基于1.7 μm小颗粒技术的UPLC，与人们熟知的HPLC技术具有相同的分离原理。不同的是：UPLC不仅比传统HPLC具有更高的分离能力，而且结束了人们多年来不得不在速度和分离度之间忍痛割舍的历史。使用UPLC可以在很宽的线速度、流速和高反压下进行高效的分离工作，并获得优异的结果。见下图

    UPLC用1.7μm颗粒提高了分离能力，可以分离出更多的色谱峰，从而对样品所能提供的信息达到了一个新的水平。而且又极大地缩短了开发方法所需的时间。



UPLC：HPLC的未来

UPLC可以更快的速度和更高的质量完成以往HPLC的工作，沃特世将致力于丰富已有的UPLC产品，现已推出了六种新的色谱柱，包括:BEH C18、C8、苯基和ShieldRP18、  HILIC 及HSS T3。同时还有适应UPLC使用的蒸发光散射检测器（ELSD），进一步扩展了UPLC的应用领域。

一套真正的ＵＰＬＣ需要哪些技术参数的支撑？

1、耐高压系统（要求能耐多少压力以上，真的是超过15,000psi才算吗？）

2、精确的流速和温控系统（相对标准偏差要求在多少之内？）；梯度延迟时间等？

3、小内径小填料（多少规格？）色谱柱

4、高灵敏小检测池（多大的检测池？）的检测器

5、快速进样系统（进样速率是多少？）

6、沃特世的ＵＰＬＣ参数就是当今超高效液相的标准了吗？

7、包括上文中提到的一些要求，还有哪些是其标志性参数？
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有水有渝
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2010/5/6 22:33:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

岛津超快速液相色谱仪 Prominenece UFLC:Nexera UHPLC LC-30A



Prominence UFLC通过以下特性支持快速分析：


1、小柱管和小体积的流通池降低了柱外峰展宽效应。

2、使用2.2μm颗粒大小的色谱柱Shim-pack XR-ODS,承受最大压力高达130MPa。


      Shim-pack XR-ODS是考虑上述填料细微化的问题，从分离效率和压力的关系中巧妙找到平衡，可

      提高或维持分离效果的同时缩短分析时间的新一代快速分析用色谱柱。

3、Prominence SIL-20A自动进样器实现10秒钟10μl的超快速进样。 微量分析时，交叉污染最小化以最

    小的接触面积通过进样针；可以使用多种溶剂（最多4种）彻底清洗样品流路和进样针表面;以最小的

    体积，精确并准确地进样,使用高分辨率计量泵直接进样；计量泵独立于流路之外。

4、支持高达85℃的高温分析。温度与快速分析：随着柱温升高，理论塔板数增加，柱效增高，柱压降

      低。

5、具备高采样频率的检测器，可以实现快速的数据获取而不会丢失信息。

6、专门的色谱方法转换软件，使常规色谱条件转换为UFLC条件简单易行，保证分析方法的通用性。

7、Prominence UFLC可以保证送液分辨率 3nL/min的微冲程送液、梯度送液时控制响应为0.1秒的卓越

    送液能力，可以发挥极为优越的保留时间重现性。

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2010/5/8 20:18:49 Last edit by xky0230699
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2010/5/6 22:34:46 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
沃特世超高效液相色谱仪ACQUITY UPLC H- Class

这是一款专为HPLC用户打造的超高效液相色谱系统。现在，您的实验室将有机会享用UPLC带来的超乎寻常的分析效率和无与伦比的色谱性能。





1、综合性的系统元件，为特定的生产效率和条件要求，设计了包括ACQUITY UPLC 样品组织器、色谱柱管理器与带有加热和冷却功能的柱温箱、二元溶剂管理器与样品管理器。

2、配有ACQUITY UPLC计算器可方便地将HPLC 方法转换为UPLC方法

3、支持现有的HPLC各种方法

4、具备Connections® INSIGHT 远程智能服务的在线预测性系统

5、针对用户的各种分离需求，配备了各种填料基质和规格的色谱柱，包括ACQUITY UPLC 1.7 μm的色谱柱、VanGuard 预柱，ACQUITY UPLC HSS及HSS T3 1.8 μm 色谱柱

6、配备的检测器从荧光 (FLR)、 可调紫外 (TUV), 光电二极管矩阵(PDA)和蒸发光散射(ELS) 检测器到各种规格的单极，三重四极以及飞行时间质谱仪。

7、方便地与第三方厂家的MS质谱仪器 兼容 (ABI/MDS SCIEX、 Bruker Daltonics、Thermo Fisher Scientific)

8、多溶剂混合：QSM可将四种溶剂按任何组合或比例混合。使用选配的内部溶剂选择阀，将可选溶剂扩展到多达九种，方法更加灵活。

9、直接注射取样：SM-FTN的针流入路径采用专门的技术，在高压力下能够保证精确的针密封，可实现高精度注射，具有极佳的样品回收率。

10、下一代色谱柱柱厢：我们的新式UPLC色谱柱加热器和管理器已实现了标准化，具有易于操作、体积小的活性溶剂预加热器，使系统之间具有相同的效率。色谱柱预热器保证了稳定的热效能；色谱柱管理器提供了多区域的灵活性，温度范围为4 至 90 °C ，并可叠加使用。

11、受控的滞留体积：ACQUITY UPLC H-Class 的SmartStart技术（专利待批）可同时对梯度起始时间和各个预注射步骤进行自动管理。通过将这些典型的连续过程叠加起来，能够最大程度地缩短循环时间。

附件：
ACQUITY UPLC H- Class system.pdf
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2010/5/6 23:04:56 Last edit by xky0230699
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2010/5/6 22:35:12 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
安捷伦超高效液相色谱仪：Agilent 1290 Infinity $$lc



1、无限的分析能力，结合高达1200 bar的超高压以及高达5 mL/min的高流速，最大程度地提升色谱性能、兼容性、灵活性和保障了投资回报

2、由新型Agilent Jet We aver混合器的多层微流控技术所推动的新型1290 Infinity二元泵将主动阻尼与10 μL最低延迟体积相结合，可提供超高速的梯度洗脱，并能获得优异的紫外检测灵敏度

3、1290 Infinity二极管阵列检测器全新的光学设计——包括Agilent 最大光强卡套式流通池——使得UV灵敏度和基线稳定性达到了新水平，快速光谱采集的数据传输率高达160赫兹

4、1290 Infinity自动进样器的新一代高压单阀流路设计，无需更换样品环，为极小体积和大体积样品提供高精度进样

5、自动进样器相的新型1290 FlexCube，既可实现固定样品环进样模式下的超快速运行，又可通过对针座的自动反冲使交叉污染达到最低水平

6、1290 Infinity柱温箱的新型拉出式阀驱动器和用户可更换的阀头提高了使用性，并且为超高通量、多种方法和自动方法开发解决方案奠定了基础

7、应用化学成分相同的新型ZORBAX快速分离高分辨（1.8 µm）液相色谱柱，能够方便，快捷和安全地将HP$$lc方法转移到UHP$$lc

8、新的实验室监控与诊断软件——具有直观的诊断监控能力和预警功能，发现问题及时通知——有助于对实验室进行管理，以获得最佳色谱质量
附件：
1290 Infinity LC System.pdf
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2010/5/6 23:17:37 Last edit by xky0230699
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2010/5/6 22:35:54 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
戴安UltiMate® 3000 Rapid Separation $$lc (RS$$lc)



附件：
DS-UltiMate-3000-RSLC.pdf
Bro-UltiMate-3000-RSLC.pdf
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2010/5/6 23:31:32 Last edit by xky0230699
有水有渝
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2010/5/6 23:53:09 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以上内容与emoc98311主管的系列帖子有些重复了，但侧重点不同，
这里讨论的主题是：什么样的配置才算的上是UPLC？
相关链接

超效液相色谱系列专题之一：知识介绍

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20090512/1884975/

超效液相色谱系列专题之六：仪器介绍
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20090608/1938894/

如何实现超高效液相的检测灵敏度？

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100501/2532717/
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2010/5/7 9:30:38 Last edit by xky0230699
老多_小多
emoc98311
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2010/5/7 10:40:41 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
什么样的配置才算的上是UPLC?

这个问题好，很多仪器都这么叫，其实就是穿马甲的普通LC
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johne0212
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2010/5/7 13:41:27 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很明显,UPLC就是比HPLC强悍的狠,但是好像只有Waters 可以叫UPLC,为什么呢?应该是涉及到专利的问题吧,因为Waters是第一家成功商业化UPLC的公司,其它公司也看到这个市场的蛋糕了,但是无奈他们的仪器不能用UPLC这个名字了.只有换成其它的了.

还是Waters的UPLC强,从配置到所有零部件的成熟,到配套Acquity色谱柱的全面推广.佩服.
该帖子作者被版主 xky0230699加 2积分， 2经验，加分理由：谢谢参与
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有水有渝
xky0230699
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2010/5/7 15:15:29 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
专不专利我们就不管了，叫什么也无所谓，主要讨论硬件技术范筹，各个技术参数要达到什么样的水平才能称的上的超高效液相色谱系统，不管是原创的也好，山寨的也罢，设计上有什么优势？
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onlyonejerry
onlyonejerry
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2010/5/7 15:37:33 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
了解了，不知道有没有用过的朋友来谈谈实际应用的优势，一直在关注！
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flora23
flora23
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2010/5/7 16:22:01 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
故名uplc，就是超高效，其主要比对参数是理论塔板数吧，这个是performance的主要指标吧。
实际应用中的uplc之类就是分析速度快，仍能保持高的分离度，窄的峰宽，这样就是分离度和速度的结合了。
看参数比较还是waters的成熟，包括周边相应的配件。
发现最小的颗粒是1.7um的吧，那将来还会有更小的吗？哈哈
也许再小还是基于同样的分离理论吧。 期待发展。
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