在线讲座27期:AB SCIEX 质谱技术及在应用分析领域中的进展
主讲人:AB Sciex 公司市场部产品经理 赵贵平
时间:2010年5月24日——6月1日
风肃回复于2010/05/28
AB Sciex 公司市场部产品经理 赵贵平先生,您好!我有以下问题想请教。
请问:
1. LC/MS/MS使用时,一般需要优化的参数有哪些?
2. 优化参数的步骤有没有比较经验化的程序来指导呢?
3. APCI和ESI参数优化时分别需要注意哪些问题?
赵老师答:
20、由于各家公司的离子源设计不同,需要优化的参数可能有些不同,对于AB SCIEX公司的质谱系统来说,主要优化的参数有,雾化气GS1,GS2, 电离电压IS,碰撞能量CE,去簇电压DP,雾化气温度等
21、AB SCIEX公司的质谱优化参数可以全自动进行,您只提供目标物的母离子就可以了
22、主要是选择好相应的流速,APCI (1000nl/min),ESI (200nl/min)
happydog2004回复于2010/05/24
赵贵平老师好!
请问:
1.硬电离(EI)与软电离(ESI)的二级质谱得到的分子片段相关数据有何区别?在未知物的质谱解析过程,通过高分辨质谱获得精确分子量后,如何判断可能的分子式?需要注意哪些问题(氮规则、不饱和度、同位素峰簇等)?
2.LC/MS是否也有谱库可查询或参阅?
3.反相HPLC较早出峰的组分(极性较强)通过MS获取分子量时需要注意哪些问题?流动相中含有少量挥发性缓冲盐(如醋酸铵等)会对溶质分子的电离有何影响?如何避免基质效应?
赵老师答:
1、EI和ESI的二级质谱图没有在的区别,都是将所选的母离子在碰撞室通过加一能量和惰性气体进行碎裂
离分辨质谱通过获得其准确质荷比以及相应的同位素分布,可以计算出其分子组成,并不需要氮规则/不饱和度信息,但在用高分辨质谱进行分子组成计算时,一定要保证其质荷比精确在2ppm以内,
2、目前 LC/MS还没有共公的质谱数据库,因为现在各家质谱公司的离子源设计都不一样,所以电离参数也就不同.
3、HPLC/MS中极性大的物质会在前面出峰,一般情况下,保证其保留时间大于二倍死体积时间,应该没有任何问题,流动相中有少量(小于10mM)挥发性缓冲盐大多数情况下是为了,解决分离问题,但也可能会影响到电离,在正离子方式:缓冲盐一般比目标物碱性弱就行,负离子方式:目标物酸性比缓冲盐强就好.
LC/MS/MS的基质效应是一个永恒的问题,避免基质效应的方法现在大多采用更严格的前处理方法,如果仪器的灵敏足够好,可以选择最简单的办法,就是稀释样品到浓度很低还能检测到.
frappuccino回复于2010/05/27
请问赵贵平老师:
1.AB公司的6种增强型的扫描方式,是否会产生不同于常规MRM的离子,是否能得到可靠的裂解规律支持。结果是否有裂解理论支持。
2.贵公司所说的同时定性又定量,有点奇怪。要定量的时候不就必须先定性准确了吗?若定性不准怎能谈得上定量呢?所以贵公司的仪器应该是只能得到较多的“离子信息”。
3.贵公司的仪器一直不提你机器的离子传输效率。大家都知道,如果质谱中的离子得不到很好的传输。离子在质谱中无名状的消失,则会严重的影响定量研究。而且AB无论哪种增强模式,均采用了类似离子阱的“离子富集方式”。众所周知,离子阱的离子传输效率低于传统的四级杆,所以这样的仪器设计方式能达到定量优于传统的QQQ的效果吗?
4.贵公司一直使用仪器上的一些参数进行宣传,请问你们那些参数是不是计算方法和其他公司不一致。那你们还拿你这些数据与其他公司进行对比。你们的仪器维修成本怎样?全国的工程师水平怎样,技术服务是否能跟上呢?
赵老师答:
1、AB SCIEX公司的6种增强型扫描方式,只有在QTRAP系统中有,而这个系列共有三个产品分别是3200QTRAP。4000QTRAP,QTRAP 5500,这三个产品,它们首先是三重四极杆串联质谱,具有串联四极杆质谱的所有扫描功能,其二级质谱碎裂规律完全得到质谱裂解理论的支持。
2、同时定性定量分析是基于AB SCIEX的QTRAP产品,具体讲就是用其独特的扫描方式“MRM-IDA-EPI”,一次进样可同时得至MRM的定量色谱峰和相应的二级质谱数据。而常规的串联四极杆质谱只能得到MRM的两对离子的色谱峰,而定性是仅靠两离子的比值,这样可能会有假阳问题
3、离子传输效率问题是所有质谱系统的最核心技术,其实从样品离子化到离子传输到Q0其输传效率都不到10%,现在所讲的离子传输效率是指从Q0到检测器的离子传输效率,从您讲的内容看,可能还不清楚AB SCIEX公司的QTRAP系统的结构,它首先是一台串联四极杆质谱,线性离子阱扫描,只是的Q3上多加了几路电场后,具有的扫描功能,如果不用到TRAP功能,它就是一台纯粹的串联四极杆质谱系统。
4、AB SCIEX 公司的质谱产品不与其它公司的产品进行参数上的比较,数据的稳定性,可靠性,灵敏度以及系统长期的耐用性是公司的目标,而售后的维护技术支持,应用技术支持现在都是一流的。
hongys1019回复于2010/05/28
AB Sciex 公司市场部产品经理 赵贵平先生,您好!我有以下问题想请教。
请问:离子阱质谱与四级杆质谱的最大区别是什么?各大公司的产品之间有什么区别?
赵老师答:
离子阱质谱和四极杆质谱的最大区别是扫描方式有诸多不同
离子阱质谱扫描方式包括全扫描,子离子扫描,分辨扫描,选择离子扫描,多级扫描(N=10)
串联四极杆质谱扫描方式包括全扫描,子离子扫描,母离子扫描,中性丢失扫描,选择离子扫描,多反应检测扫描
扫描方式不同就决定了它们的应用领域不同
由于我是AB SCIEX公司的,所以在这,就各家公司的产品的区别不便发表评论,谢谢
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