原文由 happydog2004(happydog2004) 发表:
赵贵平老师好!
请问:
1.硬电离(EI)与软电离(ESI)的二级质谱得到的分子片段相关数据有何区别?在未知物的质谱解析过程,通过高分辨质谱获得精确分子量后,如何判断可能的分子式?需要注意哪些问题(氮规则、不饱和度、同位素峰簇等)?
2.LC/MS是否也有谱库可查询或参阅?
3.反相HPLC较早出峰的组分(极性较强)通过MS获取分子量时需要注意哪些问题?流动相中含有少量挥发性缓冲盐(如醋酸铵等)会对溶质分子的电离有何影响?如何避免基质效应?
您好
1 EI和ESI的二级质谱图没有在的区别,都是将所选的母离子在碰撞室通过加一能量和惰性气体进行碎裂
离分辨质谱通过获得其准确质荷比以及相应的同位素分布,可以计算出其分子组成,并不需要氮规则/不饱和度信息,但在用高分辨质谱进行分子组成计算时,一定要保证其质荷比精确在2ppm以内,
2 目前 LC/MS还没有共公的质谱数据库,因为现在各家质谱公司的离子源设计都不一样,所以电离参数也就不同.
3 HPLC/MS中极性大的物质会在前面出峰,一般情况下,保证其保留时间大于二倍死体积时间,应该没有任何问题,流动相中有少量(小于10mM)挥发性缓冲盐大多数情况下是为了,解决分离问题,但也可能会影响到电离,在正离子方式:缓冲盐一般比目标物碱性弱就行,负离子方式:目标物酸性比缓冲盐强就好.
LC/MS/MS的基质效应是一个永恒的问题,避免基质效应的方法现在大多采用更严格的前处理方法,如果仪器的灵敏足够好,可以选择最简单的办法,就是稀释样品到浓度很低还能检测到.
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