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主题：【求助】等度与梯度出峰

浏览0 回复4 电梯直达
wjp820505
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发表于：2010/06/12 09:25:34 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做专属性实验，比较两种洗脱方法的优劣，制定质量标准草案，完善现有标准，梯度按英国药典本品原料药的色谱条件进行，等度按本品制剂中国质量标准色谱条件进行，把样品破坏后，分别用等度与梯度洗脱，只是流动相与流速不同，其他色谱条件相同，各杂质峰用紫外扫描后，应该是同一峰吗？出峰个数、峰面积应该一样吗？
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2010/6/12 9:58:32 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第一:先要确定各杂质峰的UV图谱是不相同的,才能确定是不是同一峰.如果有两个杂质UV图谱差不多,就不好判断.最好还是做LCMS确定.
第二:流动相和流速不同,出峰个数,峰面积可能会不一样,有可能前面的峰跑到后面出,所以最好做LCMS确定,或者标准品定位.
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xinyanyan
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2010/6/12 10:14:36 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有的杂质等度不一定能走出来，也可能包在一起不能分离，所以出峰个数和峰面积可能会有所不同
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有水有渝
xky0230699
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2010/6/12 12:38:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做过才知道，等度与梯度下的出峰个数可能不同，梯度下可能有更多的峰出现，如果梯度下我多出峰， 那个鉴别是溶剂峰，梯度引起，还是真的是杂质峰，最好有DAD检测器，进行简单的鉴别。还有柱温和梯度也有可能引起出峰顺序的不同，但这种情况比较少见，但不得不防。
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xyhdcm2002
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2010/6/12 13:29:13 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wjp820505(wjp820505) 发表:
做专属性实验，比较两种洗脱方法的优劣，制定质量标准草案，完善现有标准，梯度按英国药典本品原料药的色谱条件进行，等度按本品制剂中国质量标准色谱条件进行，把样品破坏后，分别用等度与梯度洗脱，只是流动相与流速不同，其他色谱条件相同，各杂质峰用紫外扫描后，应该是同一峰吗？出峰个数、峰面积应该一样吗？


那可不一定,虽然条件有些相同,但是你的流动相变了.如果流动相的组分没有变,那还可能是同一峰!!至于峰面积,那就肯定不一样了,因为你所用的流动相和流速都不一样了,那得出的结果肯定是不一样的.
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