主题：【第三届网络原创参赛作品】液相色谱之玩法—普通液相色谱改成凝胶色谱实录

原文由 小不董(doxw0323) 发表:
个人陋见，其实楼主没有那么大费周章的用两台仪器拆合，就用07年买的1200很好用的，理由有几个，四元泵其实就是一元泵，楼主已经说过，有在线脱气机，增加流动相的稳定性。有DAD检测器和示差检测器，得到的信息会更多，增加高分子定性的信息。不拆合新旧仪器，避免软件冲突和楼主的刷bois的事项，也是通过多做的这些事可以多了解熟悉仪器。ps：如果真的不放心氯仿会腐蚀泵，可以咨询下a公司，但我觉得四元泵是可以防氯仿腐蚀的。其实做GPC在线脱气机最好是要配置的。

原文由 小不董(doxw0323) 发表:
氯仿对仪器管路的腐蚀主要因为氯对不锈钢的腐蚀。
不是传说，是真的a公司打算用自己的软件可以控制别的仪器。这不是技术问题，二是仪器公司间的协议和源码的对外开放问题。
我们公司就有戴安的离子色谱，我们的软件狗正好可以控制两台仪器，但现在分别都是有软件控制的。不需要。
仪器的限制问题，不同公司都一定的存在。在06年前我们的液相也很少开，现在大量的使用，在所有的仪器里还算使用频率高的了。

原文由 lwlwb(lwlwb) 发表:
楼主的精神可嘉，赞一个!作为一个伪专家(现在流行这个，真专家不管这么小的细节)，给你几个知识点：
1.验证一个你的个人疑惑，样品浓度在单示差检测器的GPC系统中，只影响灵敏度，与分子量计算无关。但是在选择浓度时不宜过大，因为大分子材料样品是有粘度的，因此有时候是不能靠单纯提高浓度来获得好的响应，而要靠加大进样量。
2.溶样时千万不要剧烈搅拌，大分子会被你搅断的。
3.你看到的那几个负峰是溶剂峰，分别是：样品溶剂与流动相的差别峰，空气峰，有时候会有温度压力差别峰。
4.GPC是流体动力学体积原理，不是分子量，所以不能认为分子量小一定后出。
5.运行样品时建议同时内插己知样品，这样可以知道结果是否正确。
6.单GPC系统只能得到相对于标样的相对分子量，非常局限，你要选择跟样品非常接近的标样才行。

目前就想到了这么多，我的内容也是原创，但都是基本原理，楼主若觉有用，全数免费赠送，哈哈!

原文由 wanttofly(yaofei) 发表:

原文由 lwlwb(lwlwb) 发表:
楼主的精神可嘉，赞一个!作为一个伪专家(现在流行这个，真专家不管这么小的细节)，给你几个知识点：
1.验证一个你的个人疑惑，样品浓度在单示差检测器的GPC系统中，只影响灵敏度，与分子量计算无关。但是在选择浓度时不宜过大，因为大分子材料样品是有粘度的，因此有时候是不能靠单纯提高浓度来获得好的响应，而要靠加大进样量。
2.溶样时千万不要剧烈搅拌，大分子会被你搅断的。
3.你看到的那几个负峰是溶剂峰，分别是：样品溶剂与流动相的差别峰，空气峰，有时候会有温度压力差别峰。
4.GPC是流体动力学体积原理，不是分子量，所以不能认为分子量小一定后出。
5.运行样品时建议同时内插己知样品，这样可以知道结果是否正确。
6.单GPC系统只能得到相对于标样的相对分子量，非常局限，你要选择跟样品非常接近的标样才行。

目前就想到了这么多，我的内容也是原创，但都是基本原理，楼主若觉有用，全数免费赠送，哈哈!

谢谢,发表了这么久，终于有人关注我真正关心的问题了，我还想是不是因为我这个GPC门外汉问的问题太幼稚了，专家不愿意回答呢。
还是有些疑惑:
1：我是从重均\数均\Z均的分子量计算公式来考虑浓度对统计分子量的影响的，在公式中，不同分子量的占的比例不同，计算出的统计分子量显然会不同。而如果GPC计算时无需浓度，又如何计算统计分子量呢？
我设想是不是默认不同分子量的响应值和物质的量的比例（即一般液相色谱中的响应因子）都是一样的？这样只要看谱图中的峰形来计算就行了，不过这样在软件中就无需加标样的重量比了
是的，响应因子肯定是一样的啊，因为这是体积，体积不会有选择性的(当然建立在球型模型的基础之上)，老液相工作者肯定会有这样的问题。

2：很实用，我很小心，连超声溶样都没敢用，但还有点担心滤膜会不会也造成分子量分布的失真？

会。所以在选择滤膜和柱子时要小心，过滤和过柱子时，在滤片和筛板上的剪切力足够造成断裂。

3：我看的资料都是这么说的，但我还是不明白为什么都是负峰，包括纯氯仿进氯仿体系，温度压力差别也该有正有负吧？（也许是巧合，我碰到的和资料的都是负的，其实也有正的？）

呵呵，有正的，只是相对比较少。为什么？因为你溶解样品的溶剂是暴露在空气中，吸收了较多的空气所至(空气折光小于普通溶剂)，而在参比池内的溶剂相对与空气接触较少。

另外：
4：知道了，虽然目前我是做得单一品种，但如果以后可能碰到觉得异常情况，也就找到解释理由了。
5、6：我这个东西没标样，原来想的是拿一个样品外送作光散射检测器得到绝对分子量，然后作为标样，结果发现它不够稳定。目前用聚苯乙烯作标样，主要是外送检测机构都这么做的，好比较。其实我这个直链物质和聚苯乙烯结构还是差异挺大的。我想是不是因为有个苯环结构使比较小的动力学体积有较大分子量，做出的数据比较好看，所以大家喜欢用。不过我是为合成提供建议的，相对性就行了。