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主题：[基础知识] 实验室管理和安全操作要点

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2005/11/2 13:09:00 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

生物安全II级实验室

在普通XX强毒实验室内配备II级生物安全柜，即为生物安全II级实验室。进入生物安全II级实验室内工作，可以简化着装要求。生物安全柜上的除菌滤膜要定期更换。
本等级实验室可以使用XX菌株，进行各种类型的研究工作。如需长期保存和使用XX菌株，除实验室必须达到本等级际准外，还需要：安装与公安机关相连接的安全报警系统；具备保存细菌株所需，能够牢固锁闭的地下室或独立房间和保存菌种的专用设备，菌种的使用按卫生部（1985）《中国医学微生物菌种保藏管理办法》规定执行。

生物安全III级实验室

在生物安全II级的基础上，实验室维持恒定的－25至一30帕的负压，保证进出实验室时生气流向为由外向内，压力差10－15帕以上；保证实验室内空气流向自上而下，无横向气流和紊流，并维持万级或以上的洁净度，即达到生物安全III级标准。
本等级实验室可用于特别危险，容易产生气溶胶的实验操作，并具备较强的抗御事故能力，
疫源省省会及中国疾病预防控制中心的XX实验室应达到这一水平。本等级实验室保存与使用XX菌株的权限，与生物安全II级相同。

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2005/11/2 13:10:00 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

实验室工作制度

1. 非实验室工作人员一律禁止进入强毒实验区。
2. 实验室内禁止饮食、吸烟、接待访客和喧哗。
3. 进行强毒操作时，需有两名工作人员同时进入实验室。
4. 从事强毒工作的人员须经培训后方能参加操作，并严格按照操作规则和其它国家标准进行各项实验，准确记录实验结果。培训标准由各等级的实验室根据国家标准和规定自行制订，通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作3个月，才能获得操作资格。
5. 实验菌库由专人管理，并按照卫生部（ 1985）《中国医学微生物菌种保藏管理办法》规定执行。
6. 建立工作人员基础医学检测卡片。
7. 工作人员如有皮肤损伤、发热、感冒和妊娠六个月以上者，不能进入强造实验室。
8. 工作完毕，检查各实验室水、电、防火设备，打开防盗报警装置。
9. 从事与强毒菌有关的工作后，7日内不可离开实验室所在城市。如出现身体不适现象，应在实验室所在地进行医学观察。因工作原因必须离开时，用口服抗菌药物预防。

试验操作时的防护服装

在不同等级的实验室进行强毒操作时，应按不同的着装要求
1.简易实验室和普通强毒实验室：按下列顺序穿着防护服装：①内隔离衣裤②穿工作袜及长筒胶靴③戴白帽和小口罩（两鼻翼与口罩问用适量脱脂棉填充) ④扎三角头巾⑤穿后开口隔离服（偏衫）⑥戴20～24层的纱布大口罩或滤材口罩⑦戴医用手术手套，必要时外面套细线手套⑧进行已知毒苗动物接种、解剖或菌种开封等应戴有机玻璃面罩或防护眼镜，以防操作时细菌溅入眼内或脸部裸露皮肤。
2. 在配备生物安全柜的生物安全II级和III级实验室内，着装可简省至外科手术着装水平，即带一次性口罩、帽于、穿后开口隔离服、戴医用手术手套、普通套鞋；也可使用一次性服装，用后高
压灭菌；耐用服装经高压灭菌后可重复使用。

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2005/11/2 13:11:00 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

生物安全操作规程

开始工作之前，工作间用紫外线照射消毒20分钟，简易强毒实验室在操作前后均应进行空气和体表消毒。
1.进入强毒试验操作间后，勿用手触及身体的任何部位。
2.进行菌种开封、细菌分离培养或其它操作，生物安全II级或III级实验室应在生物安全柜中进行，普通实验室应在无菌罩中进行。
3.工作之前，生物安全柜的台面用70％酒精消毒，无菌罩的台面用消毒液消毒。
4. 进行细菌操作时，接种环应在工作灯的内焰中燃烧，以避免菌液或菌块飞溅。
5. 稀释菌液时，将吸管插入试管或烧瓶底部，用吸球缓慢打击菌液，避免产生气泡或气溶胶。
6. 随时用消毒液浸泡手套，如有操作区域污染，立即用消毒液清洗处理。如有防护服污染和手套破裂，立即置消毒液中浸泡5－10分钟后更换。
7. 进行动物试验时，勿用手直接对接或拔开注射器和针头，以免划破皮肤或无意接种。
8. 接种动物时，应在乳胶手套外加戴线手套，以免动物咬伤或划破皮肤，己接种的动物放入动物笼具中，关闭门或盖，以防动物逃逸。
9. 接种过的实验动物必须饲养在定期消毒、封闭式实验动物室或柜内，并有明确的标记和实验记录。
10.每次操作结束后，应立即清理工作台面，普通实验室台面用消毒液、生物安全柜台面用70%乙醇消毒;所有物品必须归位，关闭生物安全柜。

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2005/11/2 13:13:00 14楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

污物处理及消毒

1强毒实验室内各项工作记录和其它物品，需经消毒液浸泡或高压灭菌后，方可拿出实验室。
2实验用试管、吸管及其他器械，须装在加盖不漏的容器内，经高压灭菌后，拿出实验室。
3培养物及污物，经高压灭菌后，拿出实验室。
4出实验室的更衣顺序：先用消毒液浸泡手套5分钟，依次除去口罩、眼镜、防护服、三角头巾、鞋，再浸泡手套后脱去手套。
5洗手后以70％酒精棉球擦面部裸露部位，用3％硼酸水漱日后，离开实验室。
强毒实验室内，未经消毒的污水禁止直接排入公共排水系统。己消毒的污物集中倒入专用污物坑（污物坑的深度2－3米），不许混入居民生活垃圾。

意外事故及处理

1实验过程中，操作台或地面的污染，如菌液溢出，打破细菌平皿等，应立即喷洒消毒液，待消毒液彻底浸泡30分钟后，进行清理。清理后的物品，高压灭菌。
2实验过程中，如污染物溅落在身体表面，或有割伤、烧伤、烫伤、感染动物咬伤等情况，应立即进行紧急处理：皮肤表面用消毒液清洗，伤口以碘酒酒精消毒，眼睛用无菌生理盐水冲洗。事故的情况应报告实验室主任和上级领导。
3实验过程中，如发生气溶胶污染，应立即关闭实验室、用消毒液喷雾和紫外线照射污染的历域，24小时后再进行终未消毒。
4进行强毒操作后，有疑似症状出现时，应立即向实验室主任报告，观察就医。

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