主题：【在线讲座33期】液相色谱柱使用疑难问题解析(答疑结束）

原文由 xue2009(xue2009) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:

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原文由 plexu(plexu) 发表:

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plexu您好！我有以下问题想请教：
C18柱如果之前曾有些天一直保存在酸性环境中，会对柱子有什么损坏吗？ph在2左右。

pH2左右容易使键合在硅胶基质上的固定相水解流失，包括C18和封尾试剂的水解，封尾试剂相对更容易水解。不知道你保存的酸性环境是不是含有缓冲盐，如果不含缓冲盐，只是短期几天保存在酸性流动相中，也不必过份担心，最多相当于这几天一直在使用这根色谱柱，因此减少几天的使用寿命吧；有缓冲盐就麻烦一点，保存期间水分挥发可能会导致缓冲盐结晶在柱内析出，对柱子损伤很大。

没有缓冲盐的，那就好，但是对于峰形的问题还是很发愁，昨天还出了一个问题，同一个样品，在一台仪器上出来时分叉的峰，在另一台是一个峰，并且纯度还蛮高的，出封时间在8-10min，不知道咋办了，所用的条件应该是一样的

那就是两仪器柱子的问题咯，你用同一根柱子在两台仪器上做下看看

这倒是没试
因为仪器不是我们实验室滴
那柱子出了什么问题，会造成这样的结果呢？
是柱子的键合相流失的原因么？

一般是柱子脏了，或者固定相坍塌了，把柱子反冲下就好了，这个很容易搞定的

可是，那为什么走别的样就好好的呢？
还有没有是别的原因造成的呢？
反冲，一般选用什么试剂，有什么需要注意的吗？以前没有反冲过

那我估计就是你样品的问题，你样品是拿流动相溶的不？注意溶剂强度不能大于流动相强度。还有，你样品PH值调了没？你调样品PH值做下看。

原文由 xue2009(xue2009) 发表:
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分叉峰有很多原因但大部分是柱子筛板上有颗粒物堵塞的原因你可以先简单将柱子反冲一下如果分叉问题解决了就什么都不用往深的想了quote

可是走其他的样好好的呀
还没有反冲过柱子
反冲的话要注意什么呢quote

可能你走其它样品的时候柱子没被污染你试一下已经产生裂峰后再进其它样品看是不是峰还是分裂的？当然颗粒物堵塞筛板只是一个最可能的裂峰产生原因但不是唯一的你排除是这个原因后再往下排查

反冲的时候不接监测器可以用流动相低流速（02mlmin）反冲过夜或者以正常流速冲12小时吧quote
再进其它样品峰好好的不知道为啥？今天又有一个分叉的晕死
估计柱子有点问题吧才用了四个月imghttpsimginstrumentcomcnbbsimagesbrowem09501gifimg
反冲一般用什么溶剂呢？乙腈行么？需要加水么？我的流动相是水和乙腈里面加了酸quote
size4用纯甲醇就行size

原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
请问月旭公司的液相色谱柱接头是大众的还是有自己的规格，我们是waters的分析仪，有月旭的产品可不可以？

月旭公司的色谱柱柱头的规格是大众的，因为我们也不自己生产柱管和柱头，月旭的柱管柱头供货商也是和一些Waters、Agient和Phenomenex一样的，也许是同一家。月旭柱头规格标配是Valco型，但也可以按照客户要求提供Parker型和Waters型。

你用Waters的仪器，而开始也用的是Waters柱子，如果是用不锈钢接头，匝扣的位置就固定了。如果用月旭的柱子，可以把固定匝扣位置的那段剪掉，换一个新的匝扣就可以重新固定匝扣位置。当然如果你已换成PEEK接头，问题就不会很大。

虽然接口会影响，但是也没有必要吧，如果不漏，长期这样对柱子不好还是仪器不好？

原文由 chen0365(chen0365) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
请问：我们的液相，为了节约成本我们自己填保护柱，用废的同型号柱子填。但填完以后做标样定量分析有所改变。请问其原因。谢谢。

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:

分叉峰有很多原因，但大部分是柱子筛板上有颗粒物堵塞的原因。你可以先简单将柱子反冲一下，如果分叉问题解决了，就什么都不用往深的想了。

可是走其他的样好好的呀
还没有反冲过柱子
反冲的话要注意什么呢

可能你走其它样品的时候，柱子没被污染。你试一下，已经产生裂峰后，再进其它样品，看是不是峰还是分裂的？当然颗粒物堵塞筛板，只是一个最可能的裂峰产生原因，但不是唯一的，你排除是这个原因后，再往下排查。

反冲的时候，不接监测器，可以用流动相低流速（0.2ml/min）反冲过夜，或者以正常流速冲1-2小时吧。

原文由 yangjs88(yangjs88) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
请问：在做具有缓控释的药物制剂时，色谱柱用过不算长的一段时间后，峰形容易分叉，柱效降低，柱压力升高（柱前装有保护柱），除了按贵公司平时提供的方法清洗外，还有没有其他更好高效的方法来清洗色谱柱或再生，延长色谱柱的使用寿命，谢谢

原文由 xue2009(xue2009) 发表:
碱性小环境并会导致硅胶基体慢慢溶解不过硅胶基体的溶解会生成酸性的硅醇基谁能把方程式写出来谢啦

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:

原文由 xue2009(xue2009) 发表:

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原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
C18柱如果之前曾有些天一直保存在酸性环境中，会对柱子有什么损坏吗？ph在2左右。

pH2左右容易使键合在硅胶基质上的固定相水解流失，包括C18和封尾试剂的水解，封尾试剂相对更容易水解。不知道你保存的酸性环境是不是含有缓冲盐，如果不含缓冲盐，只是短期几天保存在酸性流动相中，也不必过份担心，最多相当于这几天一直在使用这根色谱柱，因此减少几天的使用寿命吧；有缓冲盐就麻烦一点，保存期间水分挥发可能会导致缓冲盐结晶在柱内析出，对柱子损伤很大。

没有缓冲盐的，那就好，但是对于峰形的问题还是很发愁，昨天还出了一个问题，同一个样品，在一台仪器上出来时分叉的峰，在另一台是一个峰，并且纯度还蛮高的，出封时间在8-10min，不知道咋办了，所用的条件应该是一样的

那就是两仪器柱子的问题咯，你用同一根柱子在两台仪器上做下看看

这倒是没试
因为仪器不是我们实验室滴
那柱子出了什么问题，会造成这样的结果呢？
是柱子的键合相流失的原因么？

一般是柱子脏了，或者固定相坍塌了，把柱子反冲下就好了，这个很容易搞定的

可是，那为什么走别的样就好好的呢？
还有没有是别的原因造成的呢？
反冲，一般选用什么试剂，有什么需要注意的吗？以前没有反冲过

那我估计就是你样品的问题，你样品是拿流动相溶的不？注意溶剂强度不能大于流动相强度。还有，你样品PH值调了没？你调样品PH值做下看。

样品一般是用水溶的，流动相是乙腈和水，有的样品好好的，有的样品分叉，样品从来没有测过PH，实验室没有ph计。
今天测柱效，发现峰性不对称，是不是柱子塌陷了呢?如何评价柱效？