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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】毛细管电泳做中药时遇到的问题

浏览0 回复23 电梯直达
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发表于：2010/09/25 09:44:40 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在遇到几个问题：
1：混标稀释前后在同一体系（硼砂硼酸）中进样，出的峰不一样，稀释后的混标少了几个峰。但是在其他非硼砂硼酸的体系中出峰情况一样。这是为什么呢？
2：为何同样浓度的硼砂，它的电流值却相差很大？前几天做的是86uA ,现在做的却变为19uA?
3:考察出一个较好的体系，可以达到基本分离，但是基线出现严重漂移，且有拖尾的现象，该如何改进和优化才可以解决上述完全问题？
4:混标里各组分出峰时间和单标单独进样时出峰时间不一致。

请各位赐教~~~~~不胜感激！！！
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2010/9/25 16:41:03 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的帖子有重复哦！
稀释少峰可以解释为稀释后部分样品的浓度太低，以至于仪器不能检出，这时候要适当减少稀释倍数。
单独进样和混标出峰时间不一致是因为混标的样品区带里有影响样品物质迁移的物质或因素存在，样品间的相互作用也可以影响各自的迁移时间。
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2010/9/26 9:16:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在又有一个问题呢 如果我先进混标再进单标则单标出峰时间和混标不一致，但是如果我先进单标再进混标的话那么时间就一致了 ，这是什么原因呢？
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2010/9/26 10:23:33 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tbw113(tbw113) 发表:
现在又有一个问题呢 如果我先进混标再进单标则单标出峰时间和混标不一致，但是如果我先进单标再进混标的话那么时间就一致了 ，这是什么原因呢？

你的冲洗条件太弱了，先进混标时管壁没有冲洗彻底影响了下一针单标的迁移行为，先进单标则不存在这个问题。
解决方法；延长NAOH的清洗时间（如果两针之间没有这一项的话，一定要加上），同时延长缓冲液的平衡时间。
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2010/9/26 19:27:11 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在遇到的问题是如何缩短分析时间~~分离度达到要求，但是分析时间过长，很头疼，体系用的50mmol/l的硼砂，5%甲醇，电压20kv，分析时间达到半个小时~~~~我要如何改进才可以将时间缩短到十几分钟呢？
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sunpengwjh
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2010/9/27 6:55:19 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tbw113(tbw113) 发表:
现在遇到的问题是如何缩短分析时间~~分离度达到要求，但是分析时间过长，很头疼，体系用的50mmol/l的硼砂，5%甲醇，电压20kv，分析时间达到半个小时~~~~我要如何改进才可以将时间缩短到十几分钟呢？

缩短时间就是增大电渗流，可以从这个角度去试着改变实验条件！
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2010/9/27 9:29:05 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tbw113(tbw113) 发表:
现在遇到的问题是如何缩短分析时间~~分离度达到要求，但是分析时间过长，很头疼，体系用的50mmol/l的硼砂，5%甲醇，电压20kv，分析时间达到半个小时~~~~我要如何改进才可以将时间缩短到十几分钟呢？


最快捷的方法：减少柱长。
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sunpengwjh
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2010/9/27 14:56:28 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
原文由 tbw113(tbw113) 发表:
现在遇到的问题是如何缩短分析时间~~分离度达到要求，但是分析时间过长，很头疼，体系用的50mmol/l的硼砂，5%甲醇，电压20kv，分析时间达到半个小时~~~~我要如何改进才可以将时间缩短到十几分钟呢？


最快捷的方法：减少柱长。

不影响分离效率的前提，减少柱长完全没有问题！
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2010/9/27 15:19:11 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那柱长减小的话，分离度是不是会跟着减小呢？
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2010/9/27 17:38:30 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tbw113(tbw113) 发表:
那柱长减小的话，分离度是不是会跟着减小呢？


理论是会的，你可以试一下，如果分离度很好，可以通过减少柱长来缩短分离时间。
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2010/9/28 10:43:10 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么我的混标可以分离的很好 ，但是样品却不行达不到分离度的要求呢？用的是一样的溶剂溶解的
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