主题:【求助】请教:样品紫外检测波长问题?

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beijita45
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以下为2010版药典“天麻钩藤颗粒”中钩藤的TLC鉴别试验:

取本品6g或3g(无蔗糖),研细,用浓氨试液湿润后,加氯仿50ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加无水乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取钩藤对照药材1g,同法制成对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5~10μl,分别点于同一以1%NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上,以甲苯-氯仿-丙酮-甲醇-浓氨试液(4:5:4:3:0.8)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。

小弟有一点不明:上述提取方案,包括浓氨泡、氯仿提,应该是针对钩藤的主要成分--生物碱类成分的吧,这样的话,为何后面的紫外检测波长选365nm,而不是选254nm呢?钩藤中的主要成分-吲哚类生物碱,都是在230~250左右有紫外吸收啊,此处很纠结,请达人指教,非常感谢!!
另外,用NaOH制备的硅胶板,也是利于生物碱类成分形成斑点吗?还是其他作用呢?再谢!
bow~~
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不知楼主所说的生物碱在365和254处的吸收分别是多少?
365处的吸收最大?
亦或者254处有辅料成分的的影响吧?
楼主可以试试的~~


beijita45
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原文由 寒冰(cxm2009) 发表:
不知楼主所说的生物碱在365和254处的吸收分别是多少?
365处的吸收最大?
亦或者254处有辅料成分的的影响吧?
楼主可以试试的~~



钩藤中几个主要生物碱的紫外吸收,我是通过HPLC里看DAD的,最大吸收多集中在240nm附近,360nm没有吸收
另外,想问一下:硅胶G板和硅胶GF254板,在使用上有哪些不同呢?分别适合什么情况?是否可以相互代替?
问题较多,呵呵。。
再谢!!
冷冷的冰雨
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一般是选用最大波长,但是有时候因为种种原因也不用最大波长(例如:在最大波长处杂质干扰严重就不选用)
做生物碱薄层时候,为了防止斑点拖尾一般会采取1、展开剂中加入少量的碱2、展缸中放入氨水饱和展缸3、铺板时用碱制备薄层板
冷冷的冰雨
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