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主题：【求助】毛细管电流过高问题

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cyljoa
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发表于：2010/10/19 23:04:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用毛细管电泳分离药物，用的缓冲体系为40mm硼砂，30mmSDS，20%乙腈，用的75微米内径管子，发现电流达到120微安。其他条件又分不开，并且还发现我重新配一瓶相同的缓冲，结果分离不如之前的好。这是为什么啊？？有什么办法可以降低电流，分离能力又差不多。急！！！
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2010/10/20 6:45:50 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验允许的条件下，境地缓冲溶液浓度，降低电压！
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userwzy
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2010/10/20 9:02:21 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你能不能用50um的柱子试试，这样电流可以降低不小，而且一般小内径柱子分离可能效果不比大内径的差。
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2010/10/20 9:12:07 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
还有为何重配的缓冲溶液效果不好呢，新配的电流和原来的有什么差别吗？总觉得你的电流有点高，这只是个人感觉。而且我也不常用75um的柱子，不知道电流多少合适。
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ericwong
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2010/10/20 9:41:37 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
使用大内径的毛细管，对电流的影响比较大，毕竟电泳电流值与毛细管半径的平方成正比。
和楼上的建议相同，使用50 um的毛细管。
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cpudaxiao
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2010/10/20 9:44:47 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
120的电流又不高。更换缓冲液后分离效果改变很正常，所以建议条件稳定以后，一次不妨多配一些，比如500毫升。
如果分离效果还可以不要更换其他仪器条件，建议
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cyljoa
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2010/10/20 9:46:33 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:
实验允许的条件下，境地缓冲溶液浓度，降低电压！

我尝试过降低硼砂浓度，但都不能分开。我测得是血浆样品，血浆里面的杂质干扰我的药物测定。
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2010/10/20 9:49:30 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 userwzy(userwzy) 发表:
还有为何重配的缓冲溶液效果不好呢，新配的电流和原来的有什么差别吗？总觉得你的电流有点高，这只是个人感觉。而且我也不常用75um的柱子，不知道电流多少合适。


这点我也不大明白，可能是因为电流太高了，重现性就很差，所以，缓冲液有细微的变化就可能影响分离度。之前我做过一个实验，75微米管子一般30-60就差不多。
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2010/10/20 9:50:42 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 userwzy(userwzy) 发表:
你能不能用50um的柱子试试，这样电流可以降低不小，而且一般小内径柱子分离可能效果不比大内径的差。


我做的是激光诱导荧光检测器，如果换成50微米的管子，担心影响灵敏度。我又是做血液样品。所以听挺矛盾的。
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2010/10/20 10:21:47 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
120的电流又不高。更换缓冲液后分离效果改变很正常，所以建议条件稳定以后，一次不妨多配一些，比如500毫升。
如果分离效果还可以不要更换其他仪器条件，建议


对啊，我就是之前摸好了这个条件，然后就配了个500ml的缓冲，结果一试，就发现分离的不如之前的好了。好郁闷。浪费了我好多乙腈啊！！！不知道是什么原因
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cpudaxiao
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2010/10/21 9:10:18 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cyljoa(cyljoa) 发表:
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
120的电流又不高。更换缓冲液后分离效果改变很正常，所以建议条件稳定以后，一次不妨多配一些，比如500毫升。
如果分离效果还可以不要更换其他仪器条件，建议


对啊，我就是之前摸好了这个条件，然后就配了个500ml的缓冲，结果一试，就发现分离的不如之前的好了。好郁闷。浪费了我好多乙腈啊！！！不知道是什么原因


电泳的重现性本来就不好，重复多做几次就好了。
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