实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8110314今日发帖：17 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
分离/萃取
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【转帖】层析柱相关应用

浏览0 回复12 电梯直达
learner1999
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2010/12/10 09:15:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
层析柱
  极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统
  极性较大的用甲醇：氯仿系统
  极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统
  拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
硅胶柱层析
下面介绍我现在惯用的方法：匀浆法。
  1。称量称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。
  2。搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。
  3。装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。
该帖子作者被版主 幽灵龙猫加 5积分， 2经验，加分理由：感谢分享 辛苦了~
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
learner1999
learner1999
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/10 9:15:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
4。压实。沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
  5。上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。
  6。过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。
  7。检测。要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。
  8。送谱。收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的最后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。
  1.先根据TLC方法筛选好洗脱剂，使两相邻物质Rf值之差最大化
  2.将柱子必须装平整、均匀
  3.考虑有限柱填料的吸附量
  4.可考虑用剃度法分开并洗脱
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
learner1999
learner1999
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/10 9:17:08 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好
  柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。
  现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。
  真空液相层析即vacuum liquid chromatography(VLC),即用真空代替压力进行层析，具体方法可见Synthesis,2001,No,16,2431-,and J chem edu,1997,10,1222-干法上样，一般用于固体或粘度大的液体样品。样品用低沸点易溶溶剂溶解，加入1-3倍的粗硅胶，晾干或旋干，干燥的标准是硅胶成细粉而不粘在瓶壁上。装好的柱子上留一段溶剂，把吸附了样品的硅胶慢慢到进去，震动柱子或再加一些溶剂，把粘在柱壁上的硅胶洗下
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
阿三
junqiwudi
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/11 11:11:54 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
关于楼主的 关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好 个人觉得得具体情况具体分析 呵呵
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
2010/12/11 11:12:15 Last edit by junqiwudi
头像更新中，请稍候…
kaikaifeng
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/16 23:51:03 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统

事实上，柱层析的时候，用多种系统是很痛苦的
这涉及到回收的问题
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
阿三
junqiwudi
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/17 0:15:22 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:
极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统

事实上，柱层析的时候，用多种系统是很痛苦的
这涉及到回收的问题
而且梯度多了也很麻烦 等度跑还行
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
2010/12/18 14:04:14 Last edit by junqiwudi
头像更新中，请稍候…
kaikaifeng
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/17 23:48:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 阿三(junqiwudi) 发表:
原文由 环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:
极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统

事实上，柱层析的时候，用多种系统是很痛苦的
这涉及到回收的问题
而且梯度多了也很麻烦 等都泡还行

主要是他们的比例问题不好确定，比较麻烦
一般都不能回收利用的，很浪费
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
yuduoling
yuduoling
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/21 19:56:27 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个方法确实不错的
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
It`s me
foumy
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/21 23:16:32 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于用极性溶解溶解的可以考虑硅胶吸附后旋干干法上柱。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
头像更新中，请稍候…
kaikaifeng
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/22 11:08:14 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 艺泰安邦(foumy) 发表:
对于用极性溶解溶解的可以考虑硅胶吸附后旋干干法上柱。

你说的其实就是拌样吧
但是，这种旋干法，可能吸附不会很好
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
阿三
junqiwudi
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/12/22 13:49:56 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 艺泰安邦(foumy) 发表:
对于用极性溶解溶解的可以考虑硅胶吸附后旋干干法上柱。
倒是可以尝试下
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【转帖】层析柱相关应用
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁