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紫外可见分光光度计（UV）

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主题：【求助】标准曲线配制中出现的怪现象？

浏览0 回复8 电梯直达

heshaopeng2000

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发表于：2010/12/30 09:30:17 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位好！希望能帮忙分析一下原因！
在配制一个样品的标准曲线时发现样品的最大吸收波长随着浓度的变化发生变化了，吸光度小于1.0，却不成线性。实验信息如下：

在较低浓度时最大吸收波长为258nm，浓度较高时为286nm，按照这两个波长分别的拟合曲线如下：

虽然最后按照286nm建立拟合曲线的线性还不错，R2=0.9990，但是对上述原因还是不太清楚，请各位专家分析一下原因，难道是样品浓度太高？补充一句：样品的分子量354.8。

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2010/12/30 9:50:46 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

258nm是最大吸收波长,可能超过了线性范围.

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tutm

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2011/1/1 23:21:37 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有没可能样品在你的溶剂中溶解得并不好？可能有聚集问题。
调节溶剂极性试试。

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祥子

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2011/1/3 16:58:36 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

应该不是仪器的问题。

然后.....这个比较难。

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heshaopeng2000

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2011/1/4 22:48:37 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tutm(tutm) 发表:
有没可能样品在你的溶剂中溶解得并不好？可能有聚集问题。
调节溶剂极性试试。

样品的溶剂：甲醇：水=9:1，因为在水中溶解度比较小，很难配制标准溶液，因此使用混合溶剂。难道这会影响到试验样品的最大吸收峰的线性？
由于在工作中经常会碰到试验样品在水中的溶解度比较小，但需要测试其水中的溶解度，因此无奈只能使用混合溶剂（分光光度法）或者液相色谱法（柱子有时无法满足啊！）。不知道能否有更好的方法？
另外，今天发现样品在（甲醇：辛醇=9:1）的溶液中所做标准曲线也是类似现象。

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