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液相色谱（LC）
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主题：液相色谱－同一个样品，在不同柱子上效果不同的疑惑

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yyqabc12
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发表于：2005/12/20 09:40:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我分析两种产品，都出现了一个问题，在流动相等条件完全相同的情况下，对同一个样品，在250/4.6的柱子上峰形可以，但是在150/4.6的柱子上，峰形很不好，在后半个蜂中间开始向后拖，拖一段后再下来，甚至有时出现分叉的现象，我改变波长，减少进样量，没有效果。请问这是怎么回事呢？在250的上面也有一点此现象但是不明显，在峰的下端出现一点。如果改变这种情况，我改变流动相的极性可以吗？是调大还是调小呢？
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2005/12/20 9:52:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱的类型和填料是否是一样的，如果不一样就没有可比性。

另外一个原因是150的色谱柱前有死体积造成的，检查一下。
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yyqabc12
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2005/12/20 10:00:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱是完全一样的，只是长短的差别。检查死体积怎么检查呢？是不是看管路插到底了没有对吗？
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tc397yu
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2005/12/20 10:16:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得色谱柱长短影响是很大的,我对同一个样品用不同长度的色谱柱有的就能分开有的就不能,事实上我发现同一根色谱柱在不同仪器上的分离效果都不一样
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2005/12/20 10:45:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
死体积首先看从进样阀后到检测器是否接头没有插到位，然后尝试把保护柱去掉看情况。

再不行，用其他的标准品进色谱柱试验是否是柱子的事。
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tanyiguang
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2005/12/20 11:27:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
短柱可能被污染或者前端固定相流失,可以将柱子反过来试一试.
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zhiguo77
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2005/12/20 13:13:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以根据你用的色谱柱类型和样品组分的极性调整一下流动相的极性，一般来说长一点的柱子对于分离复杂的成分要好一些。
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changjianjun
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2005/12/20 13:23:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
和柱子的长短没有关系,主要就是你的150的柱子里面可能发生了塌陷,也可能是由于接管的时候没有接好,造成存在死体积.
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zhiguo77
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2005/12/20 16:06:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
死体积的测量是根据从进样开始到溶剂峰出来之前这段时间，有的溶剂峰出来得比较晚，就根据第一个色谱峰出来之前的时间计算，用这段时间乘以流量就是死体积。
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mhsr
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2005/12/21 8:02:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的短柱有问题
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wym750306
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2005/12/21 8:21:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也许真的是你的色谱柱有问题（柱效低），不妨拿新的色谱柱做一下看看，或用另外一种填料的色谱柱做一下。
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