【求助】做梯度遇到的问题

caoyin9512

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2011/1/20 12:05:54 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

波长227nm

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zhao1025

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2011/1/20 15:07:55 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 caoyin9512(caoyin9512) 发表:
上面是我们在做梯度时遇到的问题,在40min左右有一个鼓包
梯度是A:水:乙腈=6:4,B:乙腈
时间 A B
0 100 0
20 100 0
60 10 90
62 100 0
70 100 0

梯度关键要使用高纯度的水和溶剂
还好你没有缓冲盐，所以使用超纯水和进口的乙腈应该会改善。

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hdzhangjian

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2011/1/20 15:51:12 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我也遇到过的，应该是在200-250nm之间吧，有关物质检测

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caoyin9512

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2011/1/21 11:03:12 14楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我们现在使用的是进口的乙腈,楼上,请问你后来是怎么解决的呢

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avayf

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2011/1/21 14:24:59 15楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

空白也有鼓包的话，那走样品时那边有峰的话应该是可以看到的。

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jhylc1976

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2011/1/21 14:53:28 16楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 caoyin9512(caoyin9512) 发表:
单走空白前面是可以的,但那个鼓包依然是存在的.

我是这么理解的，这个鼓包是正常的梯度洗脱的基线的反映，流动相的改变势必会造成基线的改变。如果想鼓包变的有规律一些，可以这么做，尽可能的解决这个问题。在进行梯度洗脱以前，用A+B=45+55进行洗脱30分钟左右，让色谱柱在这个条件下尽可能的平衡，再进行梯度洗脱，那么在40分钟处会出现一个比较尖的溶剂峰，而不是一个鼓包。

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