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主题：【求助】做梯度遇到的问题

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gufei10240
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2011/1/24 10:11:54 22楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先检查一下没有进样前是否有这样的问题
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caoyin9512
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2011/1/24 11:17:31 23楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 duankehai(duankehai) 发表:
不知楼主用的是那种色谱柱，这种梯度设置感觉不太合理，好像很少有柱子可以直接用100%的水冲洗吧，如果是反相柱我觉得很快会废掉！而且，用一般的液相走梯度出现这种凸起很正常的，你自己适当调节下吧，能不用梯度还是建议不用，如果你配的是质谱，而液相又是UPLC就好啦！
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caoyin9512
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2011/1/24 11:18:49 24楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 duankehai(duankehai) 发表:
不知楼主用的是那种色谱柱，这种梯度设置感觉不太合理，好像很少有柱子可以直接用100%的水冲洗吧，如果是反相柱我觉得很快会废掉！而且，用一般的液相走梯度出现这种凸起很正常的，你自己适当调节下吧，能不用梯度还是建议不用，如果你配的是质谱，而液相又是UPLC就好啦！

我们用的是C18柱,我们并没有用纯水.
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caoyin9512
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2011/1/24 11:25:23 25楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
时间    A            B
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62      100            0
70      100            0

把B相换成90%的乙腈试试。楼主的检测波长是多少？

先谢谢你的建议,我会先试一下,但不知这是什么原因,想请问这会不会与乙腈和水的比例有关,因为在鼓包的位置乙腈和水的比例大约是在65:35,这个是最容易产生气泡的比例,加上仪器没有在线脱气,所以出现这种情况.
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serlina
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2011/1/24 11:28:07 26楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在20-60min之间梯度就开始变化了，产生了40min的峰。然后觉得60-62min这段变化太快了
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byanzi
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2011/1/25 11:39:34 27楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看了你的谱图，首先可能是你的柱子有污染，你可以多走几针空白试剂，看看情况有没有改善。在确定柱子没有污染之后，你还想看看后面的杂质情况那就只有把你的梯度60-62分钟调成60-70分钟或更长时间试试，你设的梯度就是要将杂质一下子全部冲出来，有一个大包是很正常的
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19811128
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2011/1/25 15:31:28 28楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
主要是你的梯度变化太快了才造成这样的现象，其实对你要的图形没有影响就行了，不过平时为了美观起见，还是不建议在短时间内梯度变化这么剧烈，除非不得已。
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柏坡
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2011/1/26 9:35:01 29楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不影响结果就行，后面确实不太好看，图谱量程打短点。
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caoyin9512
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2011/1/27 12:13:11 30楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 柏坡(hgycook) 发表:
不影响结果就行，后面确实不太好看，图谱量程打短点。

你的建议真不错,可我的相关物质咋办呢?我们自己也在努力中,有好的结果告诉大家.
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hyggelig
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2011/1/28 15:26:58 31楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的这个单标还是混标啊，检测波长是多少呢
是什么类型的色谱柱
是什么类型的样品
流动相就是水吗，还是有buffer的
或者走个空白看看，或者利用一个已知的单标确定一下色谱柱等硬件没有问题
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