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液相色谱（LC）
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主题：【求助】请教：HPLC 样品检测出峰问题？？

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gaofuyyo12
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发表于：2011/03/14 17:00:26 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新药分析 梯度洗脱出峰时间提前至5分钟左右出峰

各位前辈，我最近接到一项新的实验，委托方提供的方法是甲醇：水=10:90，我们的液相色谱是反向色谱，C18柱 250mm*5mm  4.6um。由于该方法出峰时间长，理论塔板数低（三千八至四千左右），我将其方法换为乙腈，梯度洗脱（10%-30%-10%：0min-8min-12min-15min stop），出峰时间提前至5分钟左右，TP一万多，但是出峰前会上升类似于漂移，但出峰完基线在十分钟左右才开始正常漂移，峰不拖尾。请教大家如何解决?由于是新药，我们不知道其化学结构。
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2011/3/14 21:16:02 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
甲醇：水=10:90时的保留时间是多少，检测波长多少，仅因为柱效改变方法吗，改方法前与改方法后出的峰个数与强度比例是一样的吗？
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2011/3/14 21:30:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不用梯度就可以出峰啊 把出峰时间往后拖，不要使用梯度
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xiepengfei
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2011/3/15 9:53:19 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
进来学习，觉得能不用梯度还是不要梯度好，可以调节加大流动相中甲醇的比例，使得出峰时间加快的。
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