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主题：【讨论】ODS-C18柱效下降，怎么办？

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kellyfilm
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发表于：2011/03/27 21:55:48 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用C18柱测定发酵液中的有机酸，发酵液有稀释100倍经膜过滤的，但最近一段时间，色谱峰保留时间普遍向前移，且分离不是很好，请问要怎么处理？反冲的话用什么溶剂，流速多少？我现在洗柱子是用甲醇。可以再生不？请各位大侠指导。
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2011/3/27 21:59:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的流动相是什么，一般反冲可以用50%乙腈，低流速，色谱柱不接入检测器。
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kellyfilm
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2011/3/27 22:03:08 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用的流动相是3%甲醇+0.05%磷酸
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xhwy2010
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2011/3/28 15:56:53 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的流动相中甲醇含量有点低，如果不是耐水的AQ色谱柱,恐怕你的流动相会对柱子有损害，你可以用AQ色谱柱来做此样品或将有机相的比例调高到5%以上，但如果经常做此样品，还是建议换柱子。至于保留时间提前，先用3%甲醇冲掉磷酸，再逐渐过渡到纯甲醇冲洗，每次做样完毕都要经过此过程。
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〓猪哥哥〓
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2011/3/28 20:58:27 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3%的甲醇没有看懂。水不是用来溶解磷酸的吗。
楼主先观察下压力是否比以前低了，可能情况没那么糟，把前后的图谱上传一下再分析
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知足常乐！
wenshaowei-2008
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2011/3/31 15:27:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 kellyfilm(kellyfilm) 发表:
我用C18柱测定发酵液中的有机酸，发酵液有稀释100倍经膜过滤的，但最近一段时间，色谱峰保留时间普遍向前移，且分离不是很好，请问要怎么处理？反冲的话用什么溶剂，流速多少？我现在洗柱子是用甲醇。可以再生不？请各位大侠指导。

LZ这种情况是相塌陷造成的

对柱子没有损伤，只是碳链发生了紊乱，用有机相好好冲洗维护一下就可以了
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hanchunhuily
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2011/4/2 11:20:12 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
反冲估计不用了，你把磷酸换成纯水洗大约20倍柱体积后，用高有机相洗一天柱子估计就能好。
你的柱子在高水相中泡太久了，固定相碳链排列乱了 。
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