实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8042645今日发帖：500 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】样品在C18柱上不保留

浏览0 回复11 电梯直达
sunlonglong
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2011/05/09 15:41:19 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大侠，请教个问题。本人作多肽的分离纯化，用C18柱，洗脱液A0.05%TFA液，B 80% ACN液，含TFA，打算0-100% B梯度洗脱，上样后，平衡柱子时，就有峰出现，活性检测，确证就是我要的物质，但是纯度不纯。换句话说，梯度还没有开始，我的样品就被洗脱下来了。想进一步纯化，接下来该怎么办？
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
有水有渝
xky0230699
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/9 16:00:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多找找多肽高效液相色谱分离纯化方面的文献看看，找一个适合你的。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xiongbb
xiongbb
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/9 17:01:39 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我最近也在做多肽？不过我做的是制备，中压制备，有空可以交流下？
企鹅：252449462
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
守单车的蜻蜓
pbs
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/9 20:49:27 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你多肽的分子量是多大，或者可以考虑打孔径的试试呢，而且C4做蛋白应用很多，可以加qq聊 906987756
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
kylabs
kylabs
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/9 22:24:30 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
说明你的多肽分子量比较小，亲水性很强的。建议用亲水的柱子试试看。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
zhaohua8011
zhaohua8011
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/10 9:15:59 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你下载一下这篇文章看看 ：蛋白质与多肽在反相色谱柱上色谱保留行为的比较研究
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
sunlonglong
sunlonglong
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/10 9:47:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 kylabs(kylabs) 发表:
说明你的多肽分子量比较小，亲水性很强的。建议用亲水的柱子试试看。


感谢你的回复。如果你能推荐亲水的柱子，感激不尽。我们实验室的液相是安捷伦的。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
sunlonglong
sunlonglong
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/10 9:49:16 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:
你下载一下这篇文章看看 ：蛋白质与多肽在反相色谱柱上色谱保留行为的比较研究


感谢你的回复。我正在寻找这篇文献。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
sunlonglong
sunlonglong
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/10 9:59:25 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感谢各位的热心回复。我做的这个多肽，分子量不大，可能不到一万，相关的中外文献最后分离手段都是C18反相色谱柱，梯度洗脱。但是到我这里，就行不通了，我不知道还可以用什么方法把他纯化出来。

另外，我想知道，安捷伦液相色谱没有配备自动收集器，如何手动收集组分？如何确定延迟时间或体积？有没有哪位详细的说明一下操作步骤。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xizhi
xizhi
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/10 10:40:57 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
上样前的平衡不能有B液，要纯水溶，并且体积尽量小；如果不行可以把TFA的浓度提高3-5倍。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
2012/6/4 9:40:54 Last edit by xizhi
kylabs
kylabs
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/5/11 18:20:49 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sunlonglong(sunlonglong) 发表:
感谢各位的热心回复。我做的这个多肽，分子量不大，可能不到一万，相关的中外文献最后分离手段都是C18反相色谱柱，梯度洗脱。但是到我这里，就行不通了，我不知道还可以用什么方法把他纯化出来。

另外，我想知道，安捷伦液相色谱没有配备自动收集器，如何手动收集组分？如何确定延迟时间或体积？有没有哪位详细的说明一下操作步骤。


一万的分子量不算小了，不应该在柱子上没有保留，是不是你的柱子有问题了。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】样品在C18柱上不保留
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁