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液相色谱（LC）

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主题：【讨论】建立合适的分析方法

浏览0 回复16 电梯直达

蓝人

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发表于：2011/07/15 16:46:26 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最近从分析调到研发部门
负责新产品的分析研究
目前只能从网上搜集相关的文献参考着分析
有几个问题向各位前辈请教：
1，物质紫外吸收波长怎么计算？
2，根据什么来选择流动相的主要成分？
3，缓冲液和缓冲盐的添加根据什么？
4，如何根据物质的结构选择色谱柱？
希望各位前辈老师指教
万分感激

该帖子作者被版主 zhaohua8011加 3积分， 2经验，加分理由：不错的话题

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2011/7/15 16:51:50 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

物质紫外吸收波长怎么计算？
是由全波长进行扫描吧

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依旧

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2011/7/16 6:56:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我这里正好有本资料你看看，对你有木有大的帮助，波长的的选择要看你用什么方法，面积归一法的话，要求所有的组分通过检测器时都有紫外吸收，这就要求你选择的波长对你所有的组分都要有较大的吸收。如果是外标法，你只需考虑你要的组分的波长就可以了。选择最大吸收波长，可以通过波长扫描得到。

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2011/7/16 8:21:19 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 abcdefghijkl123(abcdefghijkl123) 发表:
物质紫外吸收波长怎么计算？
是由全波长进行扫描吧

我在网上有看到通过物质的结构来初步计算物质的最大吸收波长
所以我想请教下相关的资料信息

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2011/7/16 8:26:32 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 依旧(17284539) 发表:
我这里正好有本资料你看看，对你有木有大的帮助，波长的的选择要看你用什么方法，面积归一法的话，要求所有的组分通过检测器时都有紫外吸收，这就要求你选择的波长对你所有的组分都要有较大的吸收。如果是外标法，你只需考虑你要的组分的波长就可以了。选择最大吸收波长，可以通过波长扫描得到。

谢谢您，这个资料正在学习中！感觉太多了，打印下来就是几本书了！
这个流动相的主体选择甲醇或乙腈是跟据什么？不考虑价格因素的话，是不是用甲醇或乙腈都行？
在线等

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2011/7/17 21:51:56 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般通过物质的结构进行大概判断，然后进行紫外扫描来确定波长！至于其他的你可以参考类似的物质来赛选测试方法！建立方法学是相对比较难的，是一个经验积累的过程！

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2011/7/17 21:53:54 Last edit by zhaohua8011

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2011/7/18 8:57:33 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:
一般通过物质的结构进行大概判断，然后进行紫外扫描来确定波长！至于其他的你可以参考类似的物质来赛选测试方法！建立方法学是相对比较难的，是一个经验积累的过程！

能否说下“一般通过物质的结构进行大概判断”是怎么样的判断/这就是我想知道的

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xiaowang268

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2011/8/9 14:56:14 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果化合物是个酯类化合物，就选用小极性流动相，如果是个酸，就选择大极性流动相。

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johnsonxiao

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2011/8/9 16:11:38 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱柱有正相和反相，一般根据你分离的物质选择合适的色谱柱，不过貌似现在很多色谱柱供应商都提供了专用柱，如PAHS等专业柱

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xiaoqin77

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2011/8/9 21:25:37 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1，物质紫外吸收波长怎么计算？
波谱分析里有物质紫外吸收计算公式，一般选择一个含共轭烯烃的母链再根据官能团往上加。
2，根据什么来选择流动相的主要成分？
主要看要分析的物质考虑是使用正相或反相，使用流动相不同。反相一般甲醇水；
3，缓冲液和缓冲盐的添加根据什么？
根据待分离物质的性质来选择。主要用于改善峰形。
4，如何根据物质的结构选择色谱柱？
根据物质极性选吧。80%的分析可以用C18搞定，剩余的根据物质结构可以选不同填料的柱子。如氨基柱，氰基柱，手性柱等。
个人意见，请高手增加。

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有水有渝

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2011/8/9 23:52:10 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 Blue-man(yuxiaofeng86) 发表:
原文由 依旧(17284539) 发表:
我这里正好有本资料你看看，对你有木有大的帮助，波长的的选择要看你用什么方法，面积归一法的话，要求所有的组分通过检测器时都有紫外吸收，这就要求你选择的波长对你所有的组分都要有较大的吸收。如果是外标法，你只需考虑你要的组分的波长就可以了。选择最大吸收波长，可以通过波长扫描得到。

谢谢您，这个资料正在学习中！感觉太多了，打印下来就是几本书了！
这个流动相的主体选择甲醇或乙腈是跟据什么？不考虑价格因素的话，是不是用甲醇或乙腈都行？
在线等

甲醇与乙腈的选择性不同，建议先用甲醇，如果效果不好再选用乙腈，方法开发是一个不断试验，优化的过程，没有一蹴而就的方法。

除了有机相的选择，水相也很关键，如ＰＨ，离子强度，缓冲盐种类等，温度，色谱柱都是可以优化的色谱条件，波长选择最好还是用波长扫描，没有紫外分光光度计的，看看你的液相色谱仪有没有带在线扫描功能或是不是ＤＡＤ检测器。

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