主题:【讨论】亚甲蓝分光做硫化物曲线和内控样,出现这些问题,求解!!

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elin0602
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今天做了硫化物的实验,用的是50ML比色管,先加入了10ML的乙酸锌乙酸钠,然后取0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00ML的标准溶液,标准溶液是标样所直接买的,浓度为103.2mg/L,我稀释了10倍,标准使用液的浓度为10.32mg/L。然后加水到40ML左右,加入5ML的对氨基二甲基苯胺,再加1ML硫酸铁铵,摇匀,放10MIN,然后定至50ML,比色。内控样是我做完曲线显色以后才做的,也是先加10ML乙酸锌乙酸钠(内控样是用乙酸锌乙酸钠稀释25倍),再加入10ML内控样,加水至40ML,加5ML对氨基二甲基苯胺,1ML硫酸铁铵,摇匀后,10MIN后定容,比色。

这是做出来的数据。。。我想大家帮我看看,问题出在了哪里????我之前用浓度为5mg/L的标液做曲线,内控样出来也跟今天做的差不多,同样一只内控样,上一次做的挺好,为什么这次换了浓度差那么多呢??求助!!!!
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chounu
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我看了一下数据,认为有以下问题:
1.标准曲线没有包含浓度为0的点,你的质控样品吸光度低于曲线最低点不符合要求。
2.一般来说分光光度法吸光度超过1的点会带来较大误差,建议你舍去曲线最上边两个点。
3.质控样品吸光度过低,尤其是你的曲线截距较大,因此会带来较大误差,建议增大取样量,比如取20毫升或30毫升质控样品。
我把你的数据重新处理了一下,你可以参考一下。
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5.16    0.123
10.32    0.225
20.64    0.429
30.96    0.622
41.28    0.816
51.6    1.007
y=0.0193x+0.0186 r2=0.9992
计算结果为:
0.266(考虑截距) 0.363(不考虑截距)

以上建议仅供参考
scsszblxj
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5mg/L标准时的浓度:(0.00 0.05 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70)mg/L
而10mg/L标准时的浓度则分别为:0.00 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40mg/L
你的浓度点都增加了一倍,曲线就会整体上移,斜率必然会高出很多.我是这么感觉的.
scsszblxj
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我平时做的是用100mL比色管,所以浓度点没有变化,如果你还是用50mL管的话,那么就两种方法,一种是标准溶液浓度还是用5.00mg/L的,另一种是把每个点的体积减少一倍,那么浓度点则还是原来的.
scsszblxj
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原文由 chounu(chounu) 发表:
我看了一下数据,认为有以下问题:
1.标准曲线没有包含浓度为0的点,你的质控样品吸光度低于曲线最低点不符合要求。
2.一般来说分光光度法吸光度超过1的点会带来较大误差,建议你舍去曲线最上边两个点。
3.质控样品吸光度过低,尤其是你的曲线截距较大,因此会带来较大误差,建议增大取样量,比如取20毫升或30毫升质控样品。
我把你的数据重新处理了一下,你可以参考一下。
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51.6        1.007
y=0.0193x+0.0186 r2=0.9992
计算结果为:
0.266(考虑截距) 0.363(不考虑截距)

以上建议仅供参考

这个应该不是太好,截距已经太大了,截距只有在小于等于0.0003以下才不记入计算吧.这个截距验证应该不会合格吧.
elin0602
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原文由 scsszblxj(scsszblxj) 发表:
我平时做的是用100mL比色管,所以浓度点没有变化,如果你还是用50mL管的话,那么就两种方法,一种是标准溶液浓度还是用5.00mg/L的,另一种是把每个点的体积减少一倍,那么浓度点则还是原来的.
提醒我了。。。谢谢
elin0602
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原文由 chounu(chounu) 发表:
我看了一下数据,认为有以下问题:
1.标准曲线没有包含浓度为0的点,你的质控样品吸光度低于曲线最低点不符合要求。
2.一般来说分光光度法吸光度超过1的点会带来较大误差,建议你舍去曲线最上边两个点。
3.质控样品吸光度过低,尤其是你的曲线截距较大,因此会带来较大误差,建议增大取样量,比如取20毫升或30毫升质控样品。
我把你的数据重新处理了一下,你可以参考一下。
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y=0.0193x+0.0186 r2=0.9992
计算结果为:
0.266(考虑截距) 0.363(不考虑截距)

以上建议仅供参考
谢谢啊,感谢
yajaer
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会不会是标液与标样混淆了?标样浓度应该是取10稀释到250后的浓度。
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