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毛细管电泳（CE）

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主题：【求助】关于样品在buffer里的形态问题的困扰

浏览0 回复15 电梯直达

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rrkqkqp

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2012/4/11 11:53:41 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

做一个空白，一点点往里头加你做的物质，看每加一个物质多出来几个峰
相同含量峰面积是否有变化。

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nini2006

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2012/4/11 15:27:17 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 rrkqkqp(rrkqkqp) 发表:
做一个空白，一点点往里头加你做的物质，看每加一个物质多出来几个峰
相同含量峰面积是否有变化。

正解~

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hope0211

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2012/4/12 11:03:20 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

看了楼主的帖子，我想到一个问题，感觉自己被绕进去了。如果分析物有3个或者更多pKa值，根据出峰情况选定buffer的最优pH，也许这个最优pH只是大于第一级pKa值两个单位，但小于第二级pKa值，那么处理样品的时候是不是在进样前也要调整提取液的pH值到最优pH呢？不然的话，不同pH下分析物存在形式不同啊，不能定量了就···问题大发了。求解。

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2012/4/12 13:49:39 Last edit by nini2006

nini2006

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2012/4/12 13:51:07 14楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 hope0211(hope0211) 发表:
看了楼主的帖子，我想到一个问题，感觉自己被绕进去了。如果分析物有3个或者更多pKa值，根据出峰情况选定buffer的最优pH，也许这个最优pH只是大于第一级pKa值两个单位，但小于第二级pKa值，那么处理样品的时候是不是在进样前也要调整提取液的pH值到最优pH呢？不然的话，不同pH下分析物存在形式不同啊，不能定量了就···问题大发了。求解。

一般情况还是会只得到一个峰的，因为解离和结合是一个动态的过程。除非是解离速度远远大于结合的过程。这个可以通过动力学方程式的计算结果预测推理。
如果真是发生解离速度远远大于结合速度出现两个峰的情况，最好是不用这个条件的pH值，或者选择其中一个峰做定量分析，一样的定量方法，因为浓度和峰的比例是一样的。

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