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毛细管电泳（CE）

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主题：【求助】毛细管电流降低

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rosemarinus

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发表于：2012/04/19 10:15:18 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

诸位大侠，本人做手性拆分，条件已经摸好，隔了半个月再做，完全重现不出来，管子重新活化过，也用缓冲平衡管子30min，原来对映体的两个峰，现在就剩一个。想想只能换管子，问题就又来了，电流本来是60微安左右，现在电流很稳，但是降到25微安了，样品峰没有拆分开，而且峰很小。问题到底出在哪里呢，要崩溃了，各位高手来出出主意吧...

该帖子作者被版主 nini2006加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖提问

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2012/4/19 16:11:37 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

毛细管停用那么长时间应该在停用前处理后再放置，比如将管干燥等。对于你目前的问题，建议把缓冲溶液重新配置再试试。

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2012/4/19 18:14:18 Last edit by nini2006

rosemarinus

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2012/4/20 16:13:02 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

嗯停用前已经处理了。缓冲是新配的，样品什么的应该没问题。我用的手性拆分剂是国产的牛黄胆酸钠，请问会不会是这个的问题呢？

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rosemarinus

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2012/4/20 16:17:35 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

对了，电流问题已解决，但是峰的问题还是不行，现在我用不同PH的缓冲再次试，奇怪的是，PH不同还能走成一样的，并且也都是一个峰，另个对映体还是没出现...

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2012/4/20 16:29:50 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 rosemarinus(rosemarinus) 发表:
对了，电流问题已解决，但是峰的问题还是不行，现在我用不同PH的缓冲再次试，奇怪的是，PH不同还能走成一样的，并且也都是一个峰，另个对映体还是没出现...

这就是CE为什么不能像HPLC那么普及的原因了，太容易受影响，一点点条件的改变都有可能引起新的问题。一般换了新管子，很难走得跟原来一模一样。另外配溶液什么的都要注意，有时候就是一点点疏忽就会造成重复不出来。你说pH不同还能走得跟原来一样，那有可能是你pH测得有问题。pH的测量其实要还满高的，每次测量你都要保证温度探针都用，用之前要校准等，不然就会导致测量不准确

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