主题：【讨论】原核表达与真核表达载体有什么区别

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发表于：2012/10/01 13:04:18 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

区别呢原核表达载体在原核生物表达，真核的在真核表达很像废话呵呵呵呵。。。。就是原核载体可以将真核基因表达，但是表达出来的蛋白是没有活性的，因为缺少翻译后修饰系统。。。真核的表达载体呢由于比较大不适合大量快速扩增，所以要在其载体上构建可以在原核生物如大肠杆菌中复制的所需的复制原件。。。。综上在应用的时候要构建穿梭质粒可以穿梭于原核和真核呵呵还有就是原核表达载体的基本元件和真核的有不同的地方。。。。。总觉得不够正确答案。。。。。

有些人缘的蛋白在原核里没有蛋白翻译后修饰，表达后没有活性，这时候就得在真核里表达了

原核表达做抗体，真核表达做功能研究。

（1）原核载体，将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性及构象。你可以就其在蛋白纯化等方面的作用进一步进行说明。
（2）真核载体，要表达真核生物的蛋白质，采用真核表达系统自然应比原核系统优越，常用的酵母、昆虫、动物和哺乳类细胞等表达系统。真核表达载体的应用比较广，通过真核表达，可以研究某一基因的功能，比如把载有目标基因的载体导入到特定的哺乳动物细胞中以后，如果该基因发挥着某种功能，则可以通过其引起细胞的变化来说明问题等等。你可以搜索一下，这方面还是很多的。

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2012/10/1 13:04:36 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我也谈一点自己的认识：
原核表达载体或者宿主菌，其最适合于表达的，应该是原核的基因。
真核表达载体或者宿主菌，其最适合于表达的，应该是真核的基因。
我曾经和江南大学的一位博士谈及表达载体和所要表达的目的基因的关系，基本上就是：原核对原核，真核对真核。另外就是，一个表达A基因的良好的载体，在表达B基因的时候，就不一定是良好的载体了，这是一般的结论。另外，一个好的表达载体，从某种角度来讲，他可以是几个不同的基因表达的良好载体。

原核表达一般只能做抗原或者作为EMSA的结合蛋白，原核表达出来的蛋白是非功能性的。真核表达的蛋白才是功能性的蛋白，使用哺乳动物细胞表达蛋白比较简单，但是得率少，只合适用于功能研究，如分泌蛋白刺激等。而用昆虫或酵母表达出来的蛋白很多，可以直接用于生产制备。

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