主题:[求助]液相色谱分析糖类的问题

浏览0 回复16 电梯直达
quincy
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我现在在做糖类分析,想把木糖和甘露醇分开,一开始使用的是C18分离柱和示差检测器,流动相是乙腈:水=80:20,流速为1mL/min结果,分离效果不好,然后换成氨基柱,把氨基柱用流动相平衡5个小时,进样,结果图谱出现问题,一开始是0左右的基线,进样后,在3分钟左右突然降低至-6000,然后就在-6000一直走出直线.不知道是什么原因.是柱子问题还是流动相问题?我刚做了两个标准品(木糖是生化试剂,甘露醇是分析醇,用流动相溶解的)就出这种问题,应该不是样品的问题吧.请大家帮忙解决,谢谢
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tanjinhui
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换了柱子你得流动相也应该换了,至少你现在是有反相变正相。流动相极性应该变一下。不知道会不会出现样品溶解的问题。找找文献,也许有现成的方法,自己摸索有的搞了
quincy
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氨基柱即可以做正相也可以做反相的啊,而且我选用的流动相可以溶解样品的,样品都是用这个流动相配的.
拂晓晨曦
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rightnow
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我前一阵也作了糖  可能是参比池壁上有气泡  你看多进行几次R-flow  冲一冲  然后平衡  绝对值在20以内  这个方法你不妨试试
我的MSN:qulei133@hotmail.com  加我细聊
quincy
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谢谢,我会加你的.我不知道我选的流动相比例能不能把糖和糖醇分开
colleen
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基线降的很低且一直走很直的直线,你是不是没有清洗参比池啊??

氨基柱75%乙腈应该就可以把木糖和甘露糖分开的
quincy
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参比池还需要清洗的啊,我是第一次用液相,对这些真的不清楚,那么,你说的那个比例的流动相中,木糖和甘露醇的保留时间大概是多少呢?
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