主题：【原创】文献检索任务贴（3.11）任务三一一 至 任务三二零（发表任务专贴）

319.1青翘果实不同部位有效成分比较分析研究
白吉庆  王小平  李文连 
【摘要】：目的研究青翘果实不同部位中连翘酯苷A、连翘苷、齐墩果酸、芦丁、槲皮素的变化,为青翘合理利用及质量评价提供科学的依据。方法连翘苷测定:采用HPLC法,Diamonsil(钻石)C18色谱柱,流动相乙腈-水(25∶75);检测波长277nm。连翘酯苷A测定:采用HPLC法,Diamonsil(钻石)C18色谱柱,流动相乙腈-0.4%冰醋酸溶液(15∶85);检测波长330nm。齐墩果酸测定:采用HPLC法,Diamonsil(钻石)C18色谱柱,流动相乙腈-水(88∶12);检测波长208 nm。芦丁、槲皮素测定:采用HPLC法,Diamonsil(钻石)C18色谱柱,流动相甲醇-0.4%冰醋酸溶液(40∶60);检测波长283 nm。结果青翘果实的果壳、果柄、种子中均不同程度含有连翘酯苷A、连翘苷,其中种子中连翘酯苷A的含有量最高,果壳中其含有量普遍高于果柄;果壳中连翘苷的含有量最高,其次是果柄、种子。结论连翘药材青翘以果实入药和老翘以果壳入药具有不同的化学成分特征。
【作者单位】： 陕西中医学院;
【关键词】： 青翘 连翘苷 连翘酯苷A 齐墩果酸 芦丁 槲皮素 HPLC法
【基金】：陕西省重大科技创新专项项目(2008ZKC05-14) 国家中小企业创新基金项目(11C26216103652)
【分类号】：R284.1

319.2青叶胆药材及饮片中獐牙菜苦苷和龙胆苦苷的含量测定
肖琳  贾娜  何姣  孙文基 
【摘要】：目的:建立反相高效液相色谱法测定青叶胆药材及饮片中獐牙菜苦苷和龙胆苦苷的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(23∶77)为流动相,流速lmL·min-1,检测波长242nm。结果:獐牙菜苦苷和龙胆苦苷2种成分均达到基线分离,线性范围分别为30～300μg·mL-1(r=0.9997)和77.9～779μg·mL-1(r=0.9999);药材中2种成分的平均回收率为103.3%(RSD=1.0%)和97.1%(RSD=1.7%),饮片中2种成分的平均回收率为98.5%(RSD=1.9%)及97.6%(RSD=1.5%)。结论:采用RP-HPLC法同时测定青叶胆中獐牙菜苦苷和龙胆苦苷的含量,该方法简便、快速、准确,为2010年版中国药典一部增订青叶胆含量测定项做了研究。
【作者单位】： 西北大学陕西省生物医药重点实验室;
【关键词】： 青叶胆 獐牙菜苦苷 龙胆苦苷 反相高效液相色谱 含量测定
【基金】：中国药典2010年版研究项目:国家药典中发[2008]99号
【分类号】：R284

319.3氢溴酸东莨菪碱微乳透皮制剂的研究
王晶 
【摘要】： 晕动症(motion sickness,MS)是由前庭神经功能紊乱为主引起的综合征,是指乘坐交通工具时,人体内耳前庭平衡感受器受到过度运动刺激,前庭器官产生过量生物电,影响神经中枢而出现出冷汗、恶心、呕吐、头晕等症状群。借助于交通工具快速移动兵员是现代战争的特点之一,而运动病的高发生率将导致严重的非战斗减员,使战斗力下降。特别是跨越江海的战争,不能不解决缺乏乘船训练的陆军官兵的晕船问题。目前常用抗晕药有抗胆碱药、抗组胺药、钙离子拮抗剂及中草药,但这些药物以口服为主要给药形式,需在出航之前服用,一旦不发生晕船,不能及时撤药而使中枢抑制作用更加明显,严重降低军队作战能力。同样,防治晕动症在非军事性活动中也具有重要的意义。因此,开发抗晕效果显著,用药方便且副作用小的制剂具有很大的实际意义。 自1981年美国Alza公司的东莨菪碱贴剂上市以来,透皮吸收制剂以其独特的优点,成为近年来国内外医药工作者的研究热点。透皮给药可避免肝脏和胃肠道首过效应,较其他制剂能更稳定地进入血流;不必频繁给药,增加了病人的顺应性;可随时中断给药提高了安全性;并且为一些不能通过传统方式给药的病人提供了给药方式。但是,由于大多数药物不具备足够的皮肤渗透性加之皮肤角质层的屏障作用,药物的渗透速率和渗透量达不到治疗要求,因此寻找合适的促渗方法或选择适宜的透皮载体来提高药物的皮肤透过量,就成了经皮给药系统的关键。近年来,超声波法、离子导入技术、电致孔技术、纳米载药系统(如β-环糊精包合物、微球、脂质体、微乳)等已逐步得到应用。尤其是微乳在经皮给药系统方面的应用逐步成为研究的重点。 微乳是一种新型的药物载体,九十年代起才开始应用于药学领域。它是由表面活性剂、助表面活性剂、油相和水相按照一定比例形成的热力学和动力学稳定、透明或半透明、各向同性的液-液分散体系。微乳不需外力做功,可自发形成。粒径较小,一般10～100nm,粒径较小使其具有较强的组织亲和力,可使活性物质的经皮扩散速率增加,吸收明显加快。由于其良好的性能,近年来,在经皮给药方面的应用逐渐成为研究的热点。本课题采用微乳为给药载体,氢溴酸东莨菪碱为模型药,研究氢溴酸东莨菪碱微乳的制备工艺及影响因素,并进行药效学评价。 研究方法 1.空白微乳理化性质的考察 1.1在室温(25±1)℃条件下,在平底玻璃试管中,将表面活性剂与助表面活性剂按照一定质量比(Km为1:4,1:2,1:1,2:1,4:1)混合,用恒温磁力搅拌器充分混合均匀,加入油相分别按照质量比10:0,9:1,8:2,7:3,6:4,5:5,4:6,3:7,2:8,1:9混合均匀,再逐滴加入三蒸水。滴加过程中,观察体系由浊变清或由清变浊情况,记录临界点,确定微乳区界限。本研究采用聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL-35)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(Cremophor RH-40)为待考察表面活性剂,乙醇、1,2-异丙醇、正丁醇为助表面活性剂,乙酸乙酯、油酸聚乙二醇甘油酯(LabrafilM 1944 CS)、十四酸异丙酯(isopropyl myristate,IPM)、油酸(oleic acid)等为油相,通过滴定法制备空白微乳,绘制拟三元相图,考察各组分及表面活性剂与助表面活性剂质量比(Km)等因素在常温(25℃)状态下对微乳形成及形成区域面积的影响。 1.2在待考察的微乳组分的拟三元相图微乳区域中选择某微乳比例测定各组微乳粒径、粘度,并考察其不同组分对粒径、粘度的影响,结合拟三元相图,选择微乳区域较大,粒径、粘度值适宜的微乳处方。 2.氢溴酸东莨菪碱微乳理化性质的考察 在上述所选择微乳体系中,选择不同Km比值(4:1、2:1)、不同油相含量(6%、10%)及水相含量(30%、45%、60%)制备氢溴酸东莨菪碱水包油型微乳,测定各微乳粒径、粘度值,考察各组分含量变化对粒径、粘度等理化性质的影响。同时,考察系统不同药物含量对粒径、粘度值是否产生影响。 3.氢溴酸东莨菪碱微乳体外透皮实验 3.1建立氢溴酸东莨菪碱含量测定方法 建立以高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)测定氢溴酸东莨菪碱含量的方法。色谱条件如下:色谱柱为DiamonsilC_(18)色谱柱(450×4.6mm,粒径5μm);流动相为0.005mol/L磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH至3.2)-甲醇-乙腈(V/V/V:75:15:10);流速:1.0ml/min;检测波长:215nm;柱温:室温;检测灵敏度:1AUFS;进样量:20μl。并进行精密度、重复性、加样回收率实验。以浓度C(μg/ml)对峰面积(A)进行线性回归,得到氢溴酸东莨菪碱标准曲线。 3.2 Franz扩散池体外透皮吸收实验 利用水平Franz扩散池对上章所考察的各比例微乳进行体外透皮试验。选用180～200克左右雄性SD大鼠腹部皮肤,剥离腹部皮肤,小心刮去皮下脂肪组织和粘连物,用生理盐水清洗干净,用滤纸拭干,直接使用。如果需要保存的话,应置于锡箔纸中,-20℃冰箱保存,不超过1周。将皮肤平整置于水平Franz扩散池结合部,角质层面向供给池,真皮层面向接受池,在37±0.1℃恒温水浴扩散池中加入微乳4ml,接受液为4ml生理盐水,搅拌子转速为300r/min。分别于0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12h处取样,每次从接受池中取样0.5ml,同时补入37±0.1℃生理盐水0.5ml。按照已建立的HPLC法测定接受池氢溴酸东莨菪碱含量,由标准曲线计算各点接受池中药物浓度,绘制体外透皮释放曲线,计算氢溴酸东莨菪碱渗透速率(Jss)及12小时累积渗透量(Q)。结合上章粒径、粘度值优化微乳处方,最终确定氢溴酸东莨菪碱微乳制剂处方。同时考察微乳中各组分含量(水相、油相、Km值等)变化对渗透速率、累积渗透量的影响。 4.氢溴酸东莨菪碱微乳制剂的药效学实验 4.1以模拟晕船刺激后2min内的排粪颗粒数为基础指标,加上排尿、立毛、颤抖反应的评分,计算出晕反应指数,以此作为评价药物抗晕效果的主要指标。比较用药前后晕反应指数的变化,晕反应指数越低,说明药物抗晕效果越好。 4.2 32只雄性SD大鼠,体重180～200g,适应性饲养3天后,每天接受一小时模拟晕船刺激,连续3天。根据晕反应指数,将32只大鼠随机分为4组,每组8只,分别为空白对照组、口服氢溴酸东莨菪碱组、市售氢溴酸东莨菪碱贴剂组及自制氢溴酸东莨菪碱微乳制剂组。大鼠单笼饲养,自由摄入饲料和水,动物房温度保持在25℃左右。记录每24小时大鼠体增数、进食量。以晕反应指数作为药效评价主要指标。一周后,各组给予相应药物后半小时接受连续3天模拟晕船刺激,并只于第一天给药。记录晕反应指数、24小时体增数、进食量。注意每天同一时间进行称量,同一时间接受模拟晕船刺激。 实验结果 1.空白微乳形成的影响因素 实验结果显示表面活性剂的HLB值、EO基数目、助表面活性剂的碳链长度、表面活性剂和助表面活性剂质量比(Km)、油相的结构对微乳的形成及形成区域面积大小均有影响。粒径的大小与微乳区域面积大小相关性比较大,具有最大微乳区域面积的微乳体系一般具有最小的粒径,而粘度主要与物质本身性质有关。以上结果表明,微乳载体宜以聚氧乙烯氢化蓖麻油(Cremophor RH-40)为表面活性剂、无水乙醇为助表面活性剂,油酸聚乙二醇甘油酯(Labrafil M 1944 CS)为油相。 2.氢溴酸东莨菪碱微乳理化性质的考察 粒径、粘度值结果显示微乳水相、油相含量升高,Km值减小均可使体系粒径增加。由于水包油(O/W)型微乳内相为油相,所以油相含量增加对微乳粒径增大有显著影响。油相含量增加,可降低系统的粘度。除此之外,Km(s/cos)减小,乙醇含量增加,也可降低系统粘度。而微乳中药物含量的变化对微乳粘度、粒径均无显著影响。结果表明,氢溴酸东莨菪碱微乳的粒径、粘度值主要与水相、油相含量及Km值有关,而与药物含量无关。 3.氢溴酸东莨菪碱微乳体外透皮实验 3.1氢溴酸东莨菪碱、微乳色谱图显示氢溴酸东莨菪碱出峰时间在6.295min,空白微乳各辅料对其测定无干扰,专属性良好。氢溴酸东莨菪碱标准曲线为A=15866C+28150,r=0.9997。结果表明,氢溴酸东莨菪碱在10～120μg/ml范围内线性关系良好。重复性实验RSD为0.21%;精密度实验低、中、高浓度24小时内各时间点峰面积RSD分别为1.2%、0.6%、0.4%;平均回收率为99.93±0.24%,RSD为0.24%。以上结果均表明此测定方法简便可行、重复性、精密度良好。 3.2 Franz扩散池体外透皮扩散实验结果显示:在一定范围内水相含量增加、油相含量增加及Km值减小均可以使微乳透皮吸收率升高。综合上章对氢溴酸东莨菪碱微乳粒径、粘度的考察,确定氢溴酸东莨菪碱微乳处方如下:乳化剂(CremophorRH-40+无水乙醇,Km=2:1)30%,油相Labrafil 10%,三蒸水58.5%,氢溴酸东莨菪碱1.5%。 4.氢溴酸东莨菪碱微乳贴剂药效实验 各组晕反应指数实验结果显示,自制氢溴酸东莨菪碱微乳制剂组与空白组比较、口服氢溴酸东莨菪碱组相比较均具有统计学差异(P＜0.01),虽然微乳制剂组晕反应指数比阳性对照组低,但两者之间无显著差异(P＞0.05)。但比较两组给药后每日晕反应指数,发现第二、三天自制氢溴酸东莨菪碱微乳制剂组晕反应指数与阳性对照组相比明显下降,有统计学差异(P＜0.05)。结果显示:与传统氢溴酸东莨菪碱贴剂相比较,抗晕效果显著,药效持续时间更长。
【关键词】：晕动症 微乳 拟三元相图 氢溴酸东莨菪碱 透皮 晕反应指数
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R94

319.4拳参药材及复方大青叶注射液质量控制方法研究
刘瑞 
【摘要】： 复方大青叶注射液由大青叶、金银花、大黄、羌活和拳参5味药材经提取加工制成，方中拳参药材为蓼科植物拳参Polygonum bistorta L．的干燥根茎，其他四味药材已由本课题组其他同学做了详细的研究，本论文主要研究拳参药材和复方大青叶注射液的质量控制方法。 首先，对拳参药材的质量控制方法进行了研究。根据干酪素法的原理，对试验条件进行了多方面的优选，测定了拳参药材中有生理活性的鞣质的含量；采用高效液相色谱法同时测定了16批拳参药材及其伪品中没食子酸和绿原酸的含量，其色谱条件为：采用Diamonsil C_(18)(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，以甲醇-0.4％醋酸水溶液(25∶75，v／v)为流动相，流速为0.8 mL·min~(-1)室温下于290nm进行检测，没食子酸、绿原酸分别在4.24～106μg·mL~(-1)和5.0～125μg·mL~(-1)范围内具有良好的线性关系；以绿原酸为参照物，建立了拳参药材的高效液相色谱指纹图谱，实现了对其化学成分色谱峰的分离，确定了12个共有指纹峰。对药材指纹图谱数据以欧式距离平方为测度，进行聚类分析，可将拳参与其伪品明确区分。采用国家药典委员会的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度计算，结果表明12批正品拳参相似度均在0.90以上，4批伪品的相似度均在0.90以下。 其次，采用HPLC／MS~2鉴定了大青叶水提液中的化学成分。大青叶的水提液经HPLC分离后，收集各色谱峰的馏分进行二级质谱分析，并和胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的水溶液进行比较。结果表明大青叶水提液HPLC中的5个色谱峰分别与胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的保留时间和UV光谱一致，并具有相同的二级碎片离子，从而证明大青叶中含有胞苷、次黄嘌呤、尿苷、黄嘌呤和鸟苷等5种成分。并以此为基础，采用Diamonsil C_(18)(200mm×4.6mm，5μm)色谱柱，以甲醇．水(5∶95，v／v)为流动相，室温下在254nm下测定了复方大青叶注射液中尿苷的含量，方法操作简单，准确度和精密度均符合要求，提高了复方大青叶注射液的现有标准，为更好地控制注射液的质量提供了依据。 最后，采用高效液相色谱法对复方大青叶注射液进行指纹图谱分析。通过对统一工艺后各企业注射液中试和大生产注射液产品的分析和比较，建立了复方大青叶注射液的标准指纹图谱，以尿苷为内参比峰，确认了20个共有指纹峰，用国家药典委员会的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对不同批次的注射液与共有模式进行相似度计算，确定了本品的相似度阈值为0.85；通过对单味药材水煎液，中间体和注射液指纹图谱的比较，确定了药材、中间体和制剂之间良好的相关性。本法能有效控制复方大青叶注射液和中间体的质量，为完善其评价标准提供依据。
【关键词】：拳参 复方大青叶注射液 高效液相色谱指纹图谱 尿苷 中药质量控制
【学位授予单位】：沈阳药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R282;R286.0

319.5染色红花中酸性橙Ⅱ测定法的研究
赵丽佳  饶伟文  吴萌 
【摘要】：目的:建立红花中酸性橙Ⅱ的高效液相色谱定量测定方法,了解市售中药饮片红花中酸性橙Ⅱ的污染情况。方法:HPLC 法,Diamonsil~(TM) C_(18)色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为0.025 mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺,用磷酸调节 pH 值为3.0):乙腈(55:45),检测波长为484 nm,流速为1.0 mL·min~(-1),柱温为35℃,进样量为10μL。结果:酸性橙Ⅱ的浓度在0.000299～0.074790 mg·mL~(-1)范围内与其峰面积的线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为100.1%(RSD=0.28%)。市售的31批红花中酸性橙Ⅱ的检出率为48%,检出量为6～329 mg·(100 g)~(-1)。结论:本法简便、快速、准确。可用于染色红花中酸性橙Ⅱ的测定。市售红花染色现象严重。
【作者单位】： 广西桂林食品药品检验所;
【关键词】： 红花 酸性橙Ⅱ 高效液相色谱 非食用色素 染色 磷酸二氢钾 对照品 峰面积 流动相 三乙胺
【分类号】：R284

319.6热淋清颗粒HPLC指纹图谱的研究
吴红梅  王祥培  贺祝英  李良英 
【摘要】：目的:建立热淋清颗粒的HPLC色谱指纹图谱。方法:以Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱为分析柱,以乙腈-0.2%磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长为310 nm。结果:本色谱条件下热淋清颗粒各成分得到了较好的分离,标准指纹图谱由20个特征峰组成。结论:HPLC指纹图谱具有重现性好,特征性强,方法简便等特点,可用于热淋清颗粒的质量评价。
【作者单位】： 贵阳中医学院;贵阳中医学院附属第一医院;第三军医大学野战外科研究所大坪医院药剂科;
【关键词】： 热淋清颗粒 HPLC 指纹图谱
【基金】：国家中医药管理局“西部”重点学科建设资助项目(200414)
【分类号】：R286

319.7热炎宁质量控制方法与指标成分大黄素药代动力学研究
高晓霞 
【摘要】：热炎宁胶囊是由蒲公英、虎杖、败酱和半枝莲等四味药材组成的复方中药，具有清热解毒之功效。本文对其进行了质量控制方法与不同煎液中指标成分大黄素的药代动力学的比较研究。 采用高效液相色谱法分别建立了中药材蒲公英中绿原酸和咖啡酸、虎杖中大黄素、败酱中齐墩果酸和半枝莲中野黄芩苷的含量测定方法。线性范围分别为2.4～48.0μg·mL~(-1)(r=0.9995)，1.0～20.0μg·mL~(-1)(r=0.9997)，0.02～0.40mg·mL~(-1)(r=0.9999)，0.024～0.48mg·mL~(-1)(r=0.9997)和6.96～139.2μg·mL~(-1)(r=0.9997)；回收率分别为99.7％(RSD=0.8％)，100.8％(RSD=1.1％)，100.8％(RSD=1.8％)，99.3％(RSD=1.2％)和100.1％(RSD=1.8％)。所建立的HPLC测定法符合定量分析要求，为热炎宁的质量稳定提供了技术保障。 采用正交试验法对热炎宁提取工艺进行了优化。以浸膏得率、绿原酸、咖啡酸、大黄素、齐墩果酸和野黄芩苷含量为指标，采用L_9(3~4)正交表安排试验，对提取溶剂乙醇的浓度、提取溶剂量、提取次数三个因素进行优化，通过直观分析、方差分析和综合评价方法，确定最佳提取工艺为：加10倍70％乙醇，水浴回流2次，每次1h。为热炎宁的质量稳定奠定基础。 采用高效液相色谱法建立了热炎宁胶囊的质量控制方法，建立了绿原酸和咖啡酸、大黄素和野黄芩苷的含量测定方法，线性范围分别为1.7～34.0μg·mL~(-1)(r=0.9995)，2.9～58.0μg·mL~(-1)(r=0.9997)，0.02～0.40mg·mL~(-1)(r=0.9999)和6.96～139.2μg·mL~(-1)(r=0.9997)；回收率分别为96.5％(RSD=2.5％)，99.5％(RSD=1.6％)，99.3％(RSD=2.0％)和100.3％(RSD=1.8％)。其测定结果：绿原酸含量为0.395mg·粒~(-1)，咖啡酸含量为0.645mg·粒~(-1)，大黄素含量1.41mg·粒~(-1)，野黄芩苷的含量为0.93mg·粒~(-1)。所建立的HPLC测定法符合定量分析要求，为热炎宁胶囊的质量控制提供了技术保证。 采用HPLC建立了大鼠血浆和组织中大黄素的含量测定方法，以1，4-二羟基蒽醌为内标，血浆经稀硫酸水解无水乙醚萃取处理后进样分析。使用Diamonsil C_(18)(200 mm×4.6 mm，5μm，迪玛公司)色谱柱，以甲醇-乙腈-0.1％磷酸溶液(27：50：23，v／v／v)为流动相，柱温为30℃，流速为1.0 mL·min~(-1)，检测波长为250 nnq，进样量为10μL。线性范围为0.0325～6.50μg·mL~(-1)(r＞0.996)，提取回收率大于79％，日内、日间精密度均小于12％。所建立的方法符合生物样品分析要求。 大鼠经灌胃分别给予大黄素混悬液、虎杖单煎液、虎杖单煎混合液、全方混煎液和热炎宁胶囊药液后，进行了大黄素与不同煎液的药代动力学比较研究。大黄素经灌胃给予大鼠后，吸收缓慢，t_(1／2α)为3.7h，t_(1／2β)为5.6 h，Cmax为0.60μg·mL~(-1)，AUC为10.86μg·h·mL~(-1)，体内过程符合一室模型；灌胃给予虎杖单煎液后，大黄素吸收显著加快，t_(1／2α)为0.95h，t_(1／2β)为9.4 h，Cmax为2.34μg·mL~(-1)，AUC为22.10μg·h·mL~(-1)，体内过程符合二室模型；灌胃给予虎杖单煎混合液后，吸收速度加快，t_(1／2α)为0.1 h，t_(1／2β)为8.0 h，Cmax为1.07μg·mL~(-1)，AUC为8.45μg·h·mL~(-1)，体内过程符合二室模型；给予全方混煎液后，t_(1／2α)为0.3 h，t_(1／2β)为16.4h，Cmax为0.51μg·mL~(-1)，AUC为11.43μg·h·mL~(-1)，体内过程符合一室模型；给予热炎宁胶囊药液后，t_(1／2α)为0.1 h，t_(1／2β)为4.0 h，Cmax为0.60μg·mL~(-1)，AUC为6.08μg·h·mL~(-1)，体内过程符合一室模型。 大鼠灌胃给予虎杖单煎液后，大黄素迅速向组织分布。主要分布于胃、小肠和大肠，其分布量远远超过血浆，其次是肝、肾、脾和肺，在心、脑和血浆中仅有少量检出。在大鼠的9个主要脏器中均有分布，其中在大肠中分布量8h达峰，在其它脏器中的分布量随时间延长而下降；大鼠灌胃给予热炎宁胶囊后，大黄素的组织分布特征与给予大黄素给予基本一致，在肾与肺中1h达峰，以后逐渐降低。
【关键词】：热炎宁 提取工艺 质量控制 药代动力学
【学位授予单位】：沈阳药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R286.0;R285

319.8人UGT1A6重组酶的表达与化合物葡醛酸结合研究
郑水莲 
【摘要】：尿苷二磷酸葡醛酸转移酶(uridine 5'diphosphate glucuronosyltransferases,UGTs)是一类Ⅱ相代谢酶,能催化葡醛酸与其底物结合。该过程是机体的重要排泄途径之一。过去,药物代谢评价常用组织微粒体进行研究,但组织微粒体中酶系复杂,且UGT酶系属于超基因家族酶,各同工酶的底物特异性存在着交叉重叠。由于缺乏各同工酶的特异性抑制剂,所以鉴定各UGT同工酶的底物比较复杂。目前,人们已开始广泛采用体外克隆并表达人体药物代谢酶来进行药物代谢研究,且大多数UGT同工酶已通过不同表达方式在体外获得表达。例如本实验室已在CHO、CHL、V79等哺乳动物细胞中成功表达人UGT1A3、1A9。近来,利用杆状病毒-昆虫表达系统表达外源基因的技术也得到广泛地应用,本课题通过该系统来表达人UGT1亚族成员之一UGT1A6酶,并用该重组酶对一些化合物进行葡醛酸结合研究。在明确基因构成的情况下获得由特定基因所表达的UGT同工酶可以保证酶的单一性,因此能针对性地进行其代谢功能研究,了解化合物Ⅱ相葡醛酸化情况,预测所研究的化合物可能带来的体内葡醛酸化程度及化合物之间的相互作用。 1 UGT1A6基因的克隆与重组病毒的构建 采用RT-PCR技术从人肝组织中扩增出UGT1A6基因的cDNA,通过克隆载体pGEM-T扩增后,经HindⅢ/XhoⅠ双酶切得到带粘性末端的UGT1A6基因片段与表达载体pcDNA3.1(+)定向连接,亚克隆后经BSP TI/XhoⅠ双酶切处理,电
【关键词】：尿苷二磷酸葡醛酸转移酶 葡醛酸结合反应 基因表达 UGT1A6 草地夜蛾卵巢细胞 杆状病毒 UGT1A6重组酶 4-硝基酚 活性鉴定 高效液相色谱
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R341

319.9人参提取物中残留农药和重金属的测定方法研究
陈静 
【摘要】： 随着中药事业的不断发展，中药及其产品的质量越来越引起人们的重视。但在中药材的种植中，大量应用的化学农药在土壤中长期残留以及环境的污染，使中药材中的农药残留量及重金属量超标，严重影响了中药及其产品的质量。 目前，在中药中残留农药及重金属的检测和分析方面研究相对较集中，而对脱除中药中残留农药及重金属方法方面的研究相对较少。因此有效的脱除残留农药和重金属的方法，是非常有必要的。 本研究建立了人参提取物中10种有机氯农药、4种有机磷农药和2种拟除虫菊酯农药残留同时测定的气相色谱分析方法。采用丙酮-正己烷(1：4，V：V)混合溶剂超声提取，再用正已烷进行液-液分配，提取液用弗罗里硅土柱净化，采用OV-1701弹性石英毛细管柱进行程序升温技术分离，用GC-ECD同时检测，用内标物进行定量分析。结果高、中、低3个水平添加标样的回收率为82．32％～115．3％，相对标准偏差为1．5％～8．7％。该方法的检出限为：有机氯农药0．005～0．007mg·kg~(-1)，有机磷农药0．005～0．009mg·kg~(-1)，拟除虫菊酯0．005～0．008mg·kg~(-1)。绝大多数农药达到基线分离，分离度均在1．5以上。 建立了利用原子吸收仪测定人参提取物中7种重金属的方法。采用HNO_3—HClO_4混酸消化，空气-乙炔火焰及氢化物发生原子吸收光谱法测定。结果高、中、低3个水平添加标样的回收率为85．37％～120．1％，相对标准偏差为2．7％～11．4％。 建立了同时测定人参提取物中人参皂苷Rg_1、Rb_1、Re的HPLC色谱法。提取方法：70％乙醇加热回流，用水饱和的正丁醇萃取，残渣用甲醇溶解。采用DiamonsilC18柱；流动相：乙腈—0．1％磷酸溶液(三乙胺调pH=5)，梯度洗脱；检测波长203nm；流速0．8mL·min~(-1)。加样的回收率为87．02％～102．3％，相对标准偏差为1．0％～2．5％。检出限为：Rg_10．2350～4．700μg·g~(-1)，Rb_10．2300～4．600μg·g~(-1)，Re0．2000～4．000μg·g~(-1)。 建立了人参提取物中残留农药和重金属的脱除方法。筛选了50种吸附树脂，以农药、重金属去除率及人参有效成份的损失率为标准，优化选出一种树脂，进行四因素三水平正交实验法。通过试验结果得到最佳条件为：A_1B_3C_3D_2，树脂用量为20g；药液流速为0．5V／0．5h；洗水用量为1V；洗水流速为1V／h。 研究证实该方法简便，重现性好，可加以深入研究，进而推广用于其他中药材提取物。这对提高中药材及中成药质量，推动中药国际化发展具有重要的意义。
【关键词】：人参提取物 残留农药 重金属 吸附树脂 脱除
【学位授予单位】：沈阳药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R284

319.10人参质量控制的定性与定量方法研究
刘飞  贺浪冲 
【摘要】：目的:建立中药人参的质量控制方法。方法:高效液相色谱法,Diamonsil~(TM)(钻石)C_(18)分析柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(22:78),流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为203nm,柱温40℃;抗疲劳药理试验以十全大补丸为阳性对照,小鼠灌胃给药(人参总皂苷)10d后观察其游泳持续时间的变化。结果:在本色谱条件下,11份不同人参商品完整药材中人参皂苷的HPLC图谱中可检出10个相对位置稳定的色谱峰,进而确定出7个人参皂苷的共有峰,作为其定性鉴别的指标峰;人参皂苷Rg_1、Re的回收率分别为98.6％和97.8％,RSD分别为0.15％和0.13％,人参皂苷Rg_1、Re的含量分别为0.091％～0.273％和0.033％～0.258％;人参皂苷可显著延长小鼠游泳的持续时间。结论:本文所建立的人参皂苷Rg_1;、Re含量测定及人参总皂苷的HPLC图谱鉴别方法,简便、准确,可用于人参的质量控制;药理实验研究表明人参总皂苷具有明显的抗疲劳作用,且量效关系显著。
【作者单位】： 西安交通大学天然药物研究与工程中心 西安交通大学天然药物研究与工程中心
【关键词】： 人参 人参皂苷 高效液相色谱法 抗疲劳
【基金】：国家自然科学基金(批准号:20075020)
【分类号】：R282.5