主题:【讨论】悬赏征集真蛋白的检测技术(已征集18种)

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hhciq
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紫外吸收法
蛋白质分子中的酪氨酸、 苯丙氨酸和色氨酸残基使其在 2 8 0 n m处具有紫外吸收, 其吸光度与蛋白质含量成正比。此外, 蛋白质溶液在 2 3 8 n m的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系可以测定蛋白质含量。 
紫外吸收法简便、 灵敏、 快速, 不消耗样品, 测定后能回收。低浓度的盐和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测。 
此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差, 专一性差, 干扰物质多, 若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等能吸收紫外光的物质, 会出现较大的干扰。虽可以校正, 但还是存在一定的误 差。在用标准曲线法测定蛋白质含量时, 对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大 的蛋白质, 有一定的误差。故该法适用于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。此外,由于蛋白质吸收峰常因p H的改变而有变化, 因此测定样品时的 p H要与测定标
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hhciq
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楼主还有奖励吗?悬出来我好继续补充,至少还有******种
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2013/4/25 8:55:30 Last edit by hhciq
830329
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阶前尘
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原文由 天天洗碗(binglang1985) 发表:

1楼仪器的这种做法还是相当不错的,自动消化,自动滴定,效率提高了很多,但原理应该就是凯氏定氮吧


我们也有这个仪器,跟1楼的一样FOSS公司,另外这个不单能做蛋白质,硫化物等也是可以做的!
sunlitong03
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原文由 Jun Nan Li(yqfxy) 发表:
原理:食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,碱化蒸馏后使氨游离,用硼酸吸收 后,用硼酸标准溶液进行滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,得到蛋白含量。

使用仪器:FOSS 8400(相比原来的8100多了直接自动滴定的功能)



  检一个样的时长:250保持一小时,420℃保持一小时,冷却后上机检测。总计时约4.5小时。


你这还是采用的凯氏定氮法吧?
sunlitong03
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原文由 hhciq(hhciq) 发表:
楼主的那点积分够用吗?


看情形 还真有点够呛!
sunlitong03
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原文由 hhciq(hhciq) 发表:
楼主还有奖励吗?悬出来我好继续补充,至少还有******种


全给你,你在补充补充,行不行?
hhciq
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hhciq
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傅里叶近红外漫反射光谱
非破坏性分析, 能够提供完整籽粒黄豆样品成分的含量信  皂  结合 偏最小二乘回归法( P a r t i a l  L e a s t — S q u a r e s , P L S ) ,以 3 9个不同品种的完整籽粒黄豆样品建立蛋白质和脂肪含 近红外定量分析模型, 其中蛋白质、 脂肪含量分析模型的测定系数 尺  分别为 9 9 . 3 0 , 9 7 . 5 2 .相对标准偏差 R S D分别为0. 7 6 %和 1 . 3 %, 检验集的化学值与模型预测值的相关系数 r分别为0 . 9 4 7  3 , 0 . 8 6 9  5 :用所建模型对 2 6 4个不同品种的黄豆样品进行预测,并采用 R — e r r o r 指标来估计分析结果的误差,其中蛋白质和脂肪模型预测的最小相对误差分别为0. 0
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hhciq
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杜马斯燃烧定氮法
早在 1 8 3 3年,J e a n  B a p t i s t e  Du ma s 就开发出燃烧定氮法,后人定名为杜马斯 ( Du ma s )法。该方法的发明比凯氏法还早5 0年,但是由于早期的杜马斯法只能检测几个毫克的样品,使它的实际应用受到了极大的限制 ,在随后的岁月里这种方法没有被广泛的应用开来。近十年来,随着可以检测克级样品的杜马斯法快速定氮仪问世,才拉开了其在食品、饲料、肥料、植物、土壤及临床等领域上广泛应用的序幕。目前,在西方国家的很多实验室都已用杜马斯法代替凯氏法检 测全氮。
该帖子作者被版主 binglang19855积分, 2经验,加分理由:期待。。。
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