主题:【讨论】饲料中霉菌毒素检测

浏览0 回复26 电梯直达
小乌丸
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 蓝爸(lucan31977044) 发表:
原文由 催眠(v2804592) 发表:
我在做霉菌毒素的时候除了要调PH,显色时间等控制好,还有一个就是上清液的稀释这一步很关键


这个一般用什么缓冲盐

具体怎么调

还有哪几种毒素要调


稀释倍数直接影响实验的准确度,试剂盒里面的孔条涂有相对应毒素的抗体,且抗体的量是一定的,通常会有一条标准曲线,只要是超过曲线的上限或下限,结果都是不准确的,这是就要对提取液进行稀释,使结果落在曲线上面。注意稀释液要与上试剂盒最终一步的溶液保持一致。至于显色时间,我觉得倒不是特别严格控制,因为毕竟跟实验环境(温度,适度)有很大关系,可以根据试剂盒付的质量参照曲线,只要做出来的标准曲线的B/B0与参照曲线大概一致,那就没什么问题的

根据我的经验,DDGS、玉米胚芽粕、以及植物性发酵类的原料其水溶液都是酸性的,我的做法是直接以高浓度的氢氧化钠(3mol/L)调节至中性,因为是高浓度,所以要控制用量,这样就不会造成对样液的稀释而影响结果的准确性。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
2013/10/18 10:35:52 Last edit by v2729467
小乌丸
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 蓝爸(lucan31977044) 发表:
没有开发液相的方法
一直用酶联吸附法做食品中的AFB1、DON、ZEN、OTA
确实有些样品与质检局液相法检测有差别
咨询过试剂盒厂家
他们解释说
液相法过免疫亲和柱有损失
酶联吸附法没有损失 能真实反应样品情况


不完全是这样的,列如AFB1,一般的试剂盒不单单针对AFB1,对AFB2、G1/G2都会有交叉反应,而上液相的话,有唯一的标准品进行计算,所以只能计算出AFB1的准确含量,还有一个要注意的是免疫亲和柱的柱容量,国产的大概300ng,如果提取液过柱子时含量超过柱容量,那结果也是会偏低的,就要进行稀释了
小乌丸
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 小乌丸(v2729467) 发表:
原文由 蓝爸(lucan31977044) 发表:
没有开发液相的方法
一直用酶联吸附法做食品中的AFB1、DON、ZEN、OTA
确实有些样品与质检局液相法检测有差别
咨询过试剂盒厂家
他们解释说
液相法过免疫亲和柱有损失
酶联吸附法没有损失 能真实反应样品情况


不完全是这样的,列如AFB1,一般的试剂盒不单单针对AFB1,对AFB2、G1/G2都会有交叉反应,而上液相的话,有唯一的标准品进行计算,所以只能计算出AFB1的准确含量,还有一个要注意的是免疫亲和柱的柱容量,国产的大概300ng,如果提取液过柱子时含量超过柱容量,那结果也是会偏低的,就要进行稀释了
对于试剂盒检测呈假阳性,原因是多方面的,PH值、含脂量、添加剂(维生素等),未知的某些物质都会干扰到免疫酶联反应,导致结果呈假阳性或假阴性,只能是根据经验判断了
小乌丸
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
根据我上半年的检测结果,霉菌毒素试剂盒检测和液相检测的结果基本是吻合的,其中麸皮中的DON,棉粕、花生粕中的AFB1 超标非常严重,各位亲们可以留意一下这几种原料的。
小乌丸
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
最近发现有花生粕添加非蛋白氮哦,内行可能都知道不会是三聚氰胺,来猜猜看是什么吧~~!
蓝爸
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 小乌丸(v2729467) 发表:
原文由 小乌丸(v2729467) 发表:
原文由 蓝爸(lucan31977044) 发表:
没有开发液相的方法
一直用酶联吸附法做食品中的AFB1、DON、ZEN、OTA
确实有些样品与质检局液相法检测有差别
咨询过试剂盒厂家
他们解释说
液相法过免疫亲和柱有损失
酶联吸附法没有损失 能真实反应样品情况


不完全是这样的,列如AFB1,一般的试剂盒不单单针对AFB1,对AFB2、G1/G2都会有交叉反应,而上液相的话,有唯一的标准品进行计算,所以只能计算出AFB1的准确含量,还有一个要注意的是免疫亲和柱的柱容量,国产的大概300ng,如果提取液过柱子时含量超过柱容量,那结果也是会偏低的,就要进行稀释了
对于试剂盒检测呈假阳性,原因是多方面的,PH值、含脂量、添加剂(维生素等),未知的某些物质都会干扰到免疫酶联反应,导致结果呈假阳性或假阴性,只能是根据经验判断了


谢谢
催眠
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 蓝爸(lucan31977044) 发表:
原文由 催眠(v2804592) 发表:
我在做霉菌毒素的时候除了要调PH,显色时间等控制好,还有一个就是上清液的稀释这一步很关键


这个一般用什么缓冲盐

具体怎么调

还有哪几种毒素要调


用1mol的Hcl或者氢氧化钠。调至6至8.用ph试纸看
蓝爸
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 催眠(v2804592) 发表:
原文由 蓝爸(lucan31977044) 发表:
原文由 催眠(v2804592) 发表:
我在做霉菌毒素的时候除了要调PH,显色时间等控制好,还有一个就是上清液的稀释这一步很关键


这个一般用什么缓冲盐

具体怎么调

还有哪几种毒素要调


用1mol的Hcl或者氢氧化钠。调至6至8.用ph试纸看


哪几个毒素要这么调
pribofast
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
调节pH值时,建议用的NaOH 不要浓度太高。黄曲霉毒素在高浓度下的碱溶液会降解速度快。用0.5mol/l比较稳妥。
该帖子作者被版主 v28307232积分, 2经验,加分理由:讨论
职业游民
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 小乌丸(v2729467) 发表:

最近发现有花生粕添加非蛋白氮哦,内行可能都知道不会是三聚氰胺,来猜猜看是什么吧~~!


不是三聚,是二聚
该帖子作者被版主 v28307235积分, 2经验,加分理由:讨论
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴