主题:【讨论】选择流动相的技巧?(参与有奖励哦!)

浏览0 回复42 电梯直达
三人行
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在工作中你一定都积累了丰富的经验,关于流动相的选择都有哪些技巧?不妨相互交流一下,可以使我们更加开拓视野,工作上更得心应手,亲们,加油!
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三人行
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我先来
反相流动相的有机溶剂主要是是甲醇和乙腈
对流动相的优化主要在水相上下功夫,水里可以加酸、加碱、加盐,从而改善峰形、提高分离度。流动相里加碱的情况比较少,主要还是加酸,常用的酸有磷酸、三氟乙酸、甲酸、乙酸、高氯酸、甲基磺酸等,其中最常用的是磷酸和三氟乙酸,磷酸在低波长下没有紫外吸收,而三氟乙酸在低波长下有,但是三氟乙酸易挥发而磷酸不行,所以单纯做液相,低波长下磷酸最合适,三氟乙酸有吸收,运行梯度时基线漂移很严重,而做液质就要考虑首选三氟乙酸了,也可以加甲酸或乙酸。一般情况下这几种酸没有太大区别,更多的是考虑通过加酸改变流动相的pH值,从而改善样品的分离度和峰形。
老多_小多
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技巧好像没有什么特别,只是有时候走梯度的时候把3-4 个通道混合为2个,也许有很好的效果
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三人行
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原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
技巧好像没有什么特别,只是有时候走梯度的时候把3-4 个通道混合为2个,也许有很好的效果


是啊,通道多了更容易出问题。
vip_pis
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我们工程师平时做实验做的少,一般都是看别人做实验。给用户的建议就是保持实验室的清洁,保持流动相的清洁,特别是用缓冲盐做流动相的,定期更换流动相能更好的保护仪器。
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三人行
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我们工程师平时做实验做的少,一般都是看别人做实验。给用户的建议就是保持实验室的清洁,保持流动相的清洁,特别是用缓冲盐做流动相的,定期更换流动相能更好的保护仪器。


这些维护也很重要。
cminzhen
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我们流动相一般都是水相和有机相组成,水相一般加一些酸,磷酸盐等,流动相要注意的就是一定要过滤,不管其中盐类有多少,哪怕一点点也要,流动相上机前必须要超声脱气!
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doczheng
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一般含盐和不含盐的流动相都有一个更换时间的,我这边约定的含盐三天,不含五天
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三人行
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原文由 doczheng(doczheng) 发表:
一般含盐和不含盐的流动相都有一个更换时间的,我这边约定的含盐三天,不含五天


如果做课题都用同一个流动相咋办?
doczheng
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原文由 doczheng(doczheng) 发表:
一般含盐和不含盐的流动相都有一个更换时间的,我这边约定的含盐三天,不含五天


这样的话,可以预测一下实验的进度,个人建议盐和有机相最好在使用之前混合,原因有以下几点

1,盐的配制方便,多配点,就算浪费,成本也不高

2,盐和有机溶剂混合后,保存时间稍微长点,多用于溶解样品,

3,针对分离效果,新配制的流动相效果总是好些
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2013/5/16 18:45:48 Last edit by jncxyy2012
三人行
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原文由 doczheng(doczheng) 发表:
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一般含盐和不含盐的流动相都有一个更换时间的,我这边约定的含盐三天,不含五天


这样的话,可以预测一下实验的进度,个人建议盐和有机相最好在使用之前混合,原因有以下几点

1,盐的配制方便,多配点,就算浪费,成本也不高

2,盐和有机溶剂混合后,保存时间稍微长点,多用于溶解样品,

3,针对分离效果,新配制的流动相效果总是好些


不过缓冲盐不能放置时间过长,容易长菌哦。
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