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主题：【原创】葡萄酒中苯甲酸和山梨酸的检测解决方案

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Eda

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发表于：2013/06/26 15:52:51 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

山梨酸是国际粮农组织和卫生组织推荐的高效安全的防腐保鲜剂，广泛应用于食品、饮料、烟草、农药、化妆品等行业；苯甲酸（C₇H₆O₂)又称安息香酸，是苯环上的一个氢被羧基（-COOH）取代形成的化合物。苯甲酸一般常作为药物或防腐剂使用，有抑制真菌、细菌、霉菌生长的作用。

方法优势

食品卫生标准（GB/T 5009.29-2003 食品中山梨酸、苯甲酸的测定）方法中规定了配制酒类的测定方法，但未涉及葡萄酒类发酵酒。如按照国标法对葡萄酒中山梨酸和苯甲酸进行检测，葡萄酒中的天然色素和蛋白质等大分子颗粒极易堵塞色谱柱，造成柱压增大，柱效下降，使色谱柱的寿命大大缩短。为此，在样品前处理过程中使用固相萃取柱去除干扰物可有效保护色谱柱，延长使用寿命，增大分析结果可靠性。

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2013/6/26 15:55:06 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

样品准备

取1 mL样品，用5 mol/L氢氧化钠溶液调节pH至13，待净化。

SPE柱净化——ProElut PXA 500 mg/12 mL (Cat.#：68307)

(1)活化：	依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，弃去流出液；
(2)上样：	将待净化液加入柱中，弃去流出液；
(3)淋洗：	加入5 mL水，弃去流出液；
(4)洗脱： (5)重新溶解：	加入5 mL洗脱液^*，收集流出液；将洗脱液在50 ℃水浴下缓慢通入氮气吹至约2.5 mL，用流动相定容至5 mL，供HPLC分析。

洗脱液*：甲酸：甲醇水（8+2）=2：98

分析条件

色谱柱：	Spursil C18，250 mm × 4.6 mm，5 μm（Cat# 82006）
流速：	1.2 mL/min
检测器：	UV 227 nm
柱温：	40 ℃
进样量：	20 μL
流动相：	磷酸缓冲盐^*：乙腈=90：10

磷酸缓冲盐*：2.5 g KH₂PO₄和2.5 g K₂HPO₄·3H₂O，水定容至1 L。

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2013/6/26 16:10:25 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

添加回收结果

葡萄酒中苯甲酸和山梨酸添加回收结果

NO.	化合物名称	添加水平（mg/L）	回收率（%）
1	苯甲酸	10	98.04
2	山梨酸	10	102.09

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2013/6/26 16:13:15 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

葡萄酒中苯甲酸和山梨酸的检测解决方案相关产品信息：

货号	名称	规格
样品前处理
68307	混合型阴离子交换反相固相萃取柱 ProElut PXA	500 mg/12 mL，20/pk
244358	12管防交叉污染真空SPE萃取装置	12位
4806	考克(控制流量)	15/pk
99011	真空/正压两用泵，无油	1/pk
99013	抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)	1/pk
37177	针头式过滤器 Nylon	13 mm，0.22 μm 100/pk
37180	针头式过滤器 Nylon	13 mm，0.45 μm 100/pk
色谱柱及保护柱
82006	极性改性反相液相色谱柱 Spursil C18	250 × 4.6 mm，5 μm
6803	Spursil C18 保护柱柱芯	10 × 4.0 mm，2/pk
6220	EasyGuard 保护柱柱套	适用于 10 mm 保护柱
标准品
46644	苯甲酸[65-85-0]	1 mL，1 mg/mL in water
46643	山梨酸[110-44-1]	1 mL，1 mg/mL in water
HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂
50102	甲醇HPLC级	4 L
50101	乙腈HPLC级	4 L
50144	甲酸HPLC级	50 mL
50159	磷酸二氢钾，无水，HPLC级	100 g
50160	磷酸氢二钾，无水，HPLC级	100 g
通用色谱产品
52401B	瓶架/蓝色	50 孔
52401A	瓶架/白色	50孔
5323	样品瓶（棕色/螺纹）	2 mL，100/pk
5325	样品瓶盖/含垫（已经组装）	100/pk
H80465	HPLC 进样针	25 μL