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主题：【求助】请教婴幼儿奶粉中核苷酸检测偏低的解决方法？希望各位大侠赐教！

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rovany

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发表于：2013/07/10 00:05:15 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如题，我在婴幼儿奶粉检测中每次进行核苷酸检测时结果都偏低，有时甚至AMP没法测出来，请教各位大侠有什么好经验介绍可以解决该难题！

该帖子作者被版主 天天洗碗加 5积分， 2经验，加分理由：欢迎讨论

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2013/7/10 8:40:52 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

什么方法，液相荧光还是液质？
考虑一下回收率的问题

该帖子作者被版主 binglang1985加 3积分， 2经验，加分理由：还是专家给力

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hanmao

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2013/7/10 8:44:55 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

把你的处理方法，检测过程给大家SHOW一下，这样大家容易找出问题。

原文由 rovany(rovany) 发表:
如题，我在婴幼儿奶粉检测中每次进行核苷酸检测时结果都偏低，有时甚至AMP没法测出来，请教各位大侠有什么好经验介绍可以解决该难题！

该帖子作者被版主 binglang1985加 3积分， 2经验，加分理由：积极应助

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2013/7/10 19:07:28 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

HPLC法检测
1.溶解后121度灭菌
2.取2ml，加水3ml，加乙酸铵缓冲液1ml，50ul内标，50ul碱性磷酸酶，在37度反应3小时
3.取出至50ml量瓶中，加25ml 0.5M pH10.5磷酸盐缓冲液，加水定容至刻度，过滤
4.取溶液10ml过凝胶柱，15ml 0.25M 磷酸盐缓冲液过柱
5.加2ml 1N 磷酸溶液和5ml 0.1N 磷酸溶液过柱并收集至10ml，加水定容至刻度。

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2013/7/15 8:29:13 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

用什么做内标，这个方法没有做过呢，学习一下

原文由 rovany(rovany) 发表:
HPLC法检测
1.溶解后121度灭菌
2.取2ml，加水3ml，加乙酸铵缓冲液1ml，50ul内标，50ul碱性磷酸酶，在37度反应3小时
3.取出至50ml量瓶中，加25ml 0.5M pH10.5磷酸盐缓冲液，加水定容至刻度，过滤
4.取溶液10ml过凝胶柱，15ml 0.25M 磷酸盐缓冲液过柱
5.加2ml 1N 磷酸溶液和5ml 0.1N 磷酸溶液过柱并收集至10ml，加水定容至刻度。

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