紫外可见分光光度计(UV)

主题:【讨论】朗伯比尔定律成立需要的入射光强强度

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xiaodaodaoo
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    朗伯比尔定律成立条件有:单色光、平行光垂直入射、稀溶液。物质的吸光度只与物质种类、浓度及厚度有关,而与如射光强无关。可显而将一束很弱的光照射到某一物质上时,即便其任然是稀溶液,初始光的能量也将很快被吸收完。那么请问要使得朗伯比尔定律成立所需要最低的初始光强是多少?
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xuxin_3682
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理论上是没有要求的,但是需要考虑其他方面,因为能量太低的情况下会有很大的噪声。当噪声大到一定程度会严重影响测量结果滴
tutm
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楼主这个疑问其实我想应该不是定律能不能成立的问题,而实质上是透过的光强度是不是与检测器灵敏度及线性范围匹配的问题。

不管入射样品的光线强弱怎样,经过样品进入检测器的光强必须落在该元件的适用范围内,这样才能测得可靠的结果。各种检测器件的这种灵敏度和线性是不同的,既有最低光强限制,也有最高光强限度。超出了最低(或最高)光强,检测器都得不到正确的结果,这恐怕不能说是朗伯比尔定律不适用了。
该帖子作者被版主 wuxia3302积分, 2经验,加分理由:高论
小虾米
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楼主这个疑问其实我想应该不是定律能不能成立的问题,而实质上是透过的光强度是不是与检测器灵敏度及线性范围匹配的问题。

不管入射样品的光线强弱怎样,经过样品进入检测器的光强必须落在该元件的适用范围内,这样才能测得可靠的结果。各种检测器件的这种灵敏度和线性是不同的,既有最低光强限制,也有最高光强限度。超出了最低(或最高)光强,检测器都得不到正确的结果,这恐怕不能说是朗伯比尔定律不适用了。


很有见解!
xiaodaodaoo
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楼主这个疑问其实我想应该不是定律能不能成立的问题,而实质上是透过的光强度是不是与检测器灵敏度及线性范围匹配的问题。

不管入射样品的光线强弱怎样,经过样品进入检测器的光强必须落在该元件的适用范围内,这样才能测得可靠的结果。各种检测器件的这种灵敏度和线性是不同的,既有最低光强限制,也有最高光强限度。超出了最低(或最高)光强,检测器都得不到正确的结果,这恐怕不能说是朗伯比尔定律不适用了。


实验证明同样的检测器,同样的标样,在高光强下线性范围广,低光强想标准曲线提前弯曲。
xiaodaodaoo
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楼主这个疑问其实我想应该不是定律能不能成立的问题,而实质上是透过的光强度是不是与检测器灵敏度及线性范围匹配的问题。

不管入射样品的光线强弱怎样,经过样品进入检测器的光强必须落在该元件的适用范围内,这样才能测得可靠的结果。各种检测器件的这种灵敏度和线性是不同的,既有最低光强限制,也有最高光强限度。超出了最低(或最高)光强,检测器都得不到正确的结果,这恐怕不能说是朗伯比尔定律不适用了。


实验证明同样的检测器,同样的标样,在高光强下线性范围广,低光强想标准曲线提前弯曲。


检测器有最低检测限,那是噪音觉得的,没有说什么最低光强限制。
tutm
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楼主这个疑问其实我想应该不是定律能不能成立的问题,而实质上是透过的光强度是不是与检测器灵敏度及线性范围匹配的问题。

不管入射样品的光线强弱怎样,经过样品进入检测器的光强必须落在该元件的适用范围内,这样才能测得可靠的结果。各种检测器件的这种灵敏度和线性是不同的,既有最低光强限制,也有最高光强限度。超出了最低(或最高)光强,检测器都得不到正确的结果,这恐怕不能说是朗伯比尔定律不适用了。


实验证明同样的检测器,同样的标样,在高光强下线性范围广,低光强想标准曲线提前弯曲。


哦,这么个结果不是正好说明我说的道理是对的吗?

朗伯比尔定律并没有因为你使用“低光强”而不成立了,只是这时你检测器获得的光线强度已经低于其正常线性工作范围了呀!只要你提高入射光强度,使透过的光线强度也提高一些,曲线就好了。

至于我写的“最低光强度限制”,可能只是一个不太准确的综合表达方式,但我想用来说明这个问题也许够了。你说的“检测器噪音”影响,那肯定会有的,但对分光光度计来说,这可能也不是主要的。深究起来的话,还有更重要的“杂散光”影响,这才是对低透过率测试影响最大的因素啊!
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2013/8/22 17:40:53 Last edit by tutm
夕阳
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tutm
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入射光越强,信噪比越好。


但也不能太强吧?不然,检测器饱和了也测不了啦
夕阳
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入射光越强,信噪比越好。


但也不能太强吧?不然,检测器饱和了也测不了啦


呵呵!tutm老师多虑啦!

进入样品的入射光是经过单色器的单色光,这种光由于受到单色器的制约,再强也强不到哪里去了。此外仪器有自动调整平衡功能,光电倍增管的负高压可以随机调整,这与荧光分光光度计是不同的。因此大可不必操心仪器的饱和后果。
tutm
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入射光越强,信噪比越好。


但也不能太强吧?不然,检测器饱和了也测不了啦


呵呵!tutm老师多虑啦!

进入样品的入射光是经过单色器的单色光,这种光由于受到单色器的制约,再强也强不到哪里去了。此外仪器有自动调整平衡功能,光电倍增管的负高压可以随机调整,这与荧光分光光度计是不同的。因此大可不必操心仪器的饱和后果。


哦,是这样设计的
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