主题:【求助】黄曲霉毒素回收率不稳定

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DARKARAS
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我们实验室在摸黄曲霉毒素的方法,但是,从82% 88% 90% 118% 还有 百分之十几的!方法是称4g油,加标(甲醇溶解),加乙腈/水=84/16,漩涡,离心,然后取两毫升,加25mlPBS,过免疫亲和柱,再加10mlPBS洗,流速2-3秒一滴,最后吸干。
之后加1ml甲醇浸1min,收集在刻度试管内,再加1ml甲醇洗,吸干,氮吹,甲醇定容至2ml。

现在回收率很不稳定不知道什么原因,免疫亲和柱个别流速会越来越慢,方法里没有提到过滤,是不是影响到了柱子结合抗体的能力。
求大侠回复指导。我们用的是romer的免疫亲和柱
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hujiangtao
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过柱子时一定要控制好流速,这个实验免疫亲和柱质量好坏直接决定了回收率的稳定
zgylucky
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romer的免疫亲和柱在使用前要在室温下放置1.5-2小时,上样液中乙腈比例最好不要超过5%。
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