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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】【参数解读】超高效液相色谱仪器性能和技术参数解读

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老多_小多
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发表于：2013/08/03 20:41:45 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography\ UPLC）是分离科学中的一个全新类别，UPLC借助于HPLC（高效液相色法）的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。超高效液相色谱是一个新兴的领域，作为世界第一个商品化UPLC产品的Waters ACQUITY UPLCTM 超高效液相色谱系统在1996年问世，之后像安捷伦、岛津等公司也陆续开始生产超高效色谱仪。目前，超高效液相色谱仪已经开始逐渐地投入液相实验中。

如图：HPLC与UPLC分离比较



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列举部分仪器的个别参数，供参考：

技术参数：

泵系统：
最大操作压力 15000psi（1mL/min）
流速范围：0.001-2.000mL/min, 增量0.001mL；
流速精度：0.075% RSD；
流速准确度：±0.5%；
梯度准确度：± 0.3%；
梯度精度：0.15%RSD；
压力范围：0-15,000 psi；
真空脱气机：在线真空脱气，六通道均可在线脱气，有自动柱塞清洗和进样针清洗功能。

温控自动进样器:
进样精度：<0.3%RSD；
进样准确度：±1 μl；
进样线性度：> 0.999；
进样体积：0.1 to 50 μL，增量0.1μL；
样品污染度：<0.004%；
样品温度范围：4°C -40°C，增量：1°C，带制冷功能；
温控稳定性：±0.5℃；
样品盘数：96，384 两种规格；
样品瓶：2mL样品瓶，0.65mL,1.5mL两种规格的离心管。

柱温箱：
温度范围：室温以上5°C -90°C；
控温精度：±0.1°C；
温度准确性±0.5℃。
二极管阵列检测器：
二极管数：≥1024；
波长范围：190-800 nm；
分辨率：≤1.2 nm；
波长准确度：≤±1nm；
波长精度：≤±0.1nm；
基线噪音：＜±1.0×10-6AU；
基线漂移：＜1×10-4AU/h；
最大采集频率：≥100 Hz；

检测器配置 紫外可见检测器、光电二极管矩阵检测器、蒸发光散射检测器

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请您来解析：

1、一套真正的UPLC哪些技术参数是支撑？有哪些是其标志性参数？

2、耐高压系统评价：要求能耐多少压力以上才算UPLC，真的是超过15,000psi才算吗？

2、泵系统控制精确的流速，相对标准偏差要求在多少之内才算稳定？梯度延迟时间等？

3、小内径小填料色谱柱，用什么规格的最合适？

4、高灵敏小检测池的检测器，检测器的耐压，都与普通LC检测器有哪些区别？

5、你的仪器快速进样系统都是如何来实现高通量进样的？

6、超高效液相的仪器性能，你最看重哪些参数，你实际使用的仪器感觉都有哪些性能不足？

欢迎大家参与讨论，补充自己想交流的参数，说说自己的认识或者提出自己的疑问！！！

往期回顾：

【参数解读】ICP光谱仪的技术参数解读及仪器性能评价
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zyl3367898
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2013/8/3 22:31:51 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
从图上看分离度比较高，UPLC比HPLC价格上高多少。
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武灵
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2013/8/3 23:38:57 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:请您来解析：

1、一套真正的UPLC哪些技术参数是支撑？有哪些是其标志性参数？

2、耐高压系统评价：要求能耐多少压力以上才算UPLC，真的是超过15,000psi才算吗？

2、泵系统控制精确的流速，相对标准偏差要求在多少之内才算稳定？梯度延迟时间等？

3、小内径小填料色谱柱，用什么规格的最合适？

4、高灵敏小检测池的检测器，检测器的耐压，都与普通LC检测器有哪些区别？

5、你的仪器快速进样系统都是如何来实现高通量进样的？


6、超高效液相的仪器性能，你最看重哪些参数，你实际使用的仪器感觉都有哪些性能不足？
老多老师威武，一下子就整这么多问题出来。我没用过UPLC，了解的也不多。
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cminzhen
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2013/8/4 10:32:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
老多老师辛苦了！我没用过UPLC，不好评价，希望以后能有机会接触吧
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cdl1568
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2013/8/4 13:03:24 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
只有waters的超高效叫Uplc，而且是2004年推出的，好像Alliance是1996年推出的
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武灵
zhonghuashendun
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2013/8/4 20:34:47 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cdl1568(cdl1568) 发表:
只有waters的超高效叫Uplc，而且是2004年推出的，好像Alliance是1996年推出的
安捷伦的有这么早吗？我也是听说waters的是最早的吧？
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武灵
zhonghuashendun
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2013/8/4 20:37:41 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其支持性参数，我觉得是高压（远高于hplc，使其有更高的分离度、更短的分离时间），较小的死体积。UPLC的检测器与普通的不一样吗？
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cdl1568
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2013/8/4 22:49:41 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是Waters在2004年最先推出的UPLC，1996年的Waters推出的Alliance HPLC系统，不是安捷伦哦
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瀚海
v2725133
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2013/8/5 10:33:50 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
UHPLC的标志性特点就是压强高，进样量少，死体积小，流速慢，出峰快！
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westdevil
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2013/8/5 16:57:34 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1290 和 UPLC的泵 都是双电机驱动的。

这可能也是潮流了吧。把输出流量的平稳性做到极致。

我觉得对UHPLC来说，重点还是流量的精准和耐压吧，还有就是延迟体积小，响应时间要够快。别挂个2ml的混合器（某S公司），这样泵再牛X都没用。

DAD检测器也很有门道，要达到更高的灵敏度和信噪比，目前的潮流是全反射光纤流通池。貌似Agilent的是 TeflonAF管的材质（比金子都贵的材料呀），也有用石英光纤的。Waters的流通池貌似改过几版，老一些UPLC上的是挂在外面的粗棒子，新的放在机箱内了。

对UHPLC来说，我觉得提升最多的 还是泵和检测器（当然柱子就不用说了）。其他的模块貌似没有太大变化。

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xiaowang268
xiaowang268
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2013/8/5 21:40:36 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
uplc相比一般的液相，主要还在于柱子和较高的耐压系统
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