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主题：【分享】平衡色谱柱的方法

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zhouyan007
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发表于：2006/08/06 10:00:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平衡色谱柱的方法
☆反相色谱柱：
在经过出厂测试后是保存在乙腈/水的流动相体系中的，
①在平衡之前，请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶；
②新柱应先以10－20倍柱体积的5％甲醇或纯乙腈作流动相冲洗色谱柱。
③如果您所使用的流动相中含有缓冲盐或离子对试剂，应注意在乙腈冲洗后用高比例水"过渡"。即每天分析开始前必须先用高比例水冲洗30分钟以上（防止盐析出），再用缓冲盐流动相平衡； 分析结束后必须先用高比例水冲洗30分钟以上，除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟（保护柱子）。
☆硅胶柱或极性色谱柱
在经过出厂测试后是保存在正己烷的流动相体系中的，相对于反相色谱柱来说，需要更长的时间来平衡。如果极性色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相平衡之前用异丙醇平衡。即每天分析开始前必须先用异丙醇冲洗10-20倍柱体积，再换用流动相平衡； 分析结束后必须先用异丙醇冲洗10-20倍柱体积后再用正己烷冲洗30分钟（保护柱子）。


贴心提示：
①在确定分析样品的流动相时，要确保您使用的流动相和保存色谱柱的流动相互溶
②平衡过程中，将流速缓慢地提高，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜（注意：断开检测器）；然后，将流速增加到1ml/mol冲洗30分钟，以便将色谱柱的填料充分平衡至最佳状态。可以保证色谱柱的使用寿命，并且保证在以后的使用中，获得分析结果的重现性。
③再用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂的流速如果较低，则需要较长的时间来平衡）
④请注意将预柱和分析柱一起平衡
⑤每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！
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