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主题：【求助】MEKC 重现性不好

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孙艳happy
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发表于：2014/03/11 13:59:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近做胶束毛细管电泳，但是重现性特别不好，缓冲液是20mM 磷酸二氢钠-50mM SDS,pH9.还有10%的甲醇，但是出峰很不稳定~为啥？
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2014/3/11 14:03:01 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。
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孙艳happy
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2014/3/11 14:16:57 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。
之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？
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2014/3/11 14:22:12 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 孙艳happy(v2713325) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。
之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？
应该有关系的
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孙艳happy
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2014/3/11 14:30:44 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。
之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？
应该有关系的
但是我的物质也有一种不溶于乙腈
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2014/3/11 15:49:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 孙艳happy(v2713325) 发表:
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原文由 孙艳happy(v2713325) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。
之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？
应该有关系的
但是我的物质也有一种不溶于乙腈
只要你的样品的溶剂能跟你的buffer互溶就没问题了
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2014/3/11 15:53:24 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
或者你可以试试borax做buffer，borax对很多物质的溶解度比phosphate好。
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beyond1977
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2014/3/18 10:02:21 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 孙艳happy(v2713325) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。
之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？


用缓冲液配样品就不会有这种问题了吧
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dooby
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2014/3/20 8:57:15 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是溶解度的问题
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孙艳happy
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2014/3/24 14:39:47 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dooby(dooby) 发表:
是不是溶解度的问题
恩，我换了硼酸体系
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CEcret
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2014/3/24 17:22:28 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 孙艳happy(v2713325) 发表:
最近做胶束毛细管电泳，但是重现性特别不好，缓冲液是20mM 磷酸二氢钠-50mM SDS,pH9.还有10%的甲醇，但是出峰很不稳定~为啥？


根本原因还是甲醇的存在，使得你的buffer组成很容易发生变化。甲醇和乙腈都是太容易挥发了。我的建议是：你每做几针，buffer一定要替换新鲜的。

当然如果你的化合物跟管壁作用比较明显，也会导致迁移时间不稳定。这时候采用涂层管，或者动态涂层技术都可以有效改善这种负面相互作用。
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