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液相色谱（LC）

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主题：【原创】进制备液相的样品用什么溶剂溶解？

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睿武孝文

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发表于：2014/04/28 17:14:04 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

血的教训！！！

以前做分析液相，老师说，溶解样品，最好是流动相，或是初始梯度比例的流动相。

这几天一直在做制备液相，接了几次馏分，因为样品量少，所以需要把纯度低一点的馏分，需要再过一遍柱子，可是，因为贪图省事，加之经验不足，没有对馏分溶液进行旋蒸，蒸除有机相，将馏分溶液又直接进入液相了，结果，死时间后，又接着出来了，峰很高，我还以为是溶剂峰呢，进了三次，前两次都以为是溶剂峰，只到第三次才接了下来，到分析液相一看，是要的物质。悔青了。

制备液相和分析液相真的相差很大。

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2014/4/29 8:06:02 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱子的填料一样吗？

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睿武孝文

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2014/4/29 10:19:08 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tangtang(tangtang) 发表:

柱子的填料一样吗？

都是C18的，不是一个厂家的

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sally0326

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2014/4/29 17:05:10 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 睿武孝文(chaifayong) 发表:
血的教训！！！

以前做分析液相，老师说，溶解样品，最好是流动相，或是初始梯度比例的流动相。

这几天一直在做制备液相，接了几次馏分，因为样品量少，所以需要把纯度低一点的馏分，需要再过一遍柱子，可是，因为贪图省事，加之经验不足，没有对馏分溶液进行旋蒸，蒸除有机相，将馏分溶液又直接进入液相了，结果，死时间后，又接着出来了，峰很高，我还以为是溶剂峰呢，进了三次，前两次都以为是溶剂峰，只到第三次才接了下来，到分析液相一看，是要的物质。悔青了。

制备液相和分析液相真的相差很大。

那个差别不是一星半点

首先主要的一点，制备液相，基本没有“溶解样品，最好是流动相，或是初始梯度比例的流动相”这一说，因为都是需要量大的，所以一般都是浓度超高的进样

其次吧，制备不比分析，千万不能把分析的条件原封不动搬到分析，要不你就得吐血了！！分析条件很好，不代表制备就好！分析的柱子多细、柱效和分离度，和制备那就不是一个级别，分析的条件做制备，样品通常就出现你说的上述情况，直接出来了，或者就分离效果很差！

所以楼主要做实验之前，不妨查下论坛里面关于制备液相方面的帖子，关于基础知识的，我记得写了不少，楼主可以参考下

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