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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【求助】使用紫外分光光度计校准标准储备液

浏览0 回复26 电梯直达
olafo
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发表于：2014/05/16 13:52:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
国标GB 5413.9-2010中针对维生素ADE标储标定方法，使用的是紫外分光光度计测量吸光值，而后再依据公式计算出实际浓度。我用的试剂空白是色谱纯的乙醇，溶解标准品的溶剂也是色谱纯乙醇，但是空白试机归零后，使用VE标准储备液(500ug/mL)50uL于3mL比色皿中，检测出的吸光值为负数。使用的是普析的紫外分光光度计，用的是石英比色皿，标准品是西格玛的。

江湖告急！忘五湖四海兄弟姐妹们伸出援手！

疑问：

1.试剂空白是否合适？大家是否是一样的操作？

2.为什么储备液的吸光值是负值？

3.标定后的浓度与理论一般差多少？相差较大的话以标定的为准还是理论为准？
该帖子作者被版主 yqfxy加 3积分， 2经验，加分理由：很好的问题 请大家快快帮助楼主一下
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2014/5/16 22:52:35 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果出现负数，那么肯定不对
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Jun Nan Li
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2014/5/18 8:38:14 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
考虑一下 仪器的调零状态。
储备液配比的方案

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Jun Nan Li
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2014/5/18 8:40:26 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
上学的时候曾经把比色皿的毛玻璃面对着透光处，当时自己还找原因为啥吸光值是负数。
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烟雨江南
v2694188
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2014/5/18 11:42:41 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
出现负数说明空白参比的吸光度比标准还要高，参比液是否与标准的溶剂一致？不一致易出现这种情况
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qianguiyun1
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2014/5/19 19:48:04 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
调零时用的比色皿是多大的？
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小虾米
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2014/5/31 21:34:16 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以标定的浓度为准
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qianguiyun1
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2014/6/14 9:24:12 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有可能2只比色皿误差比较大
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小虾米
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2014/6/19 16:48:42 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3.标定后的浓度与理论一般差多少？相差较大的话以标定的为准还是理论为准


有示值误差可以计算的。
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WUYUWUQIU
wulin321
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2014/6/20 10:54:44 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Jun Nan Li(yqfxy) 发表:
上学的时候曾经把比色皿的毛玻璃面对着透光处，当时自己还找原因为啥吸光值是负数。


这种情况现在也有，都是不了解惹的祸
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烟雨江南
v2694188
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2014/7/31 20:33:51 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
储备液测定都出现负值说明方法处理过程还是有问题的
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