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主题：【第七届原创】甘草中甘草苷快速检测

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houjjun
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发表于：2014/10/26 12:36:18 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为houjjun原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
              甘草中甘草苷快速检测

    甘草为豆科多年生草本植物，具有清热解毒、止咳祛痰、补脾和胃、调和诸药的功效。可用于治疗脾虚便泄、胃虚口干、肺虚咳嗽、胃肠溃疡、咽喉肿痛等多种疼痛等。是我们常见的药物，效果不错而且便宜（就是味道有些怪，有些人不习惯）。

    甘草物美价廉，是大众产品，质量得有保证，检测很有必要。甘草中药用成分主要有甘草苷、甘草酸、甘草酸铵等，下面我们就介绍下高效液相色谱法检测甘草中甘草苷含量。

实验部分

原理

取适量该粉末样品加20%乙腈溶解，超声提取后，经进样器进入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量计算(外标法）。

仪器及试剂

    仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱），电子天平，溶剂过滤器，超声波清洗器，三号筛（药典筛），具塞锥形瓶，针筒式过滤器等。

    试剂：乙腈（色谱纯），冰醋酸，超纯水

样品配制

  对照品溶液配制：准确称取甘草苷对照品0.15mg于25ml容量瓶中，加20%乙腈溶液配制成60μg/ml对照品溶液，备用。

    供试品溶液配制：取适量干燥本品粉碎，过三号筛后准确称取5g置于具塞锥形瓶中，精密加入20%乙腈溶液50ml，称定重量，超声处理20min，放冷，再次称定重量，用20%乙腈溶液补足减少的重量，摇匀，0.45um微膜滤过，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器

色谱柱：VenusilXBPC18(L)(250×46mm，5μm)色谱柱

检测波长：276 nm

流动相：乙腈：0.5%冰醋酸=2:8（V：V）

流速：1.0 mL/min

柱温：30℃

进样量：10μl

对照品色谱图：

甘草样品色谱图：

    这个样品检测较简单，效果一般也都不错。值得注意的是这个方法中有三个地方需要注意，一是前处过程理中超声处理时间尽量长一些，以避免样品不能完全被提取；二是流动相选择，参考方法中有很多种流动相的选择方式，有选乙腈：0.5%冰醋酸=1:9（V：V）的，有选乙腈：0.5%冰醋酸=2:8（V：V）的，有选乙腈：0.5%冰醋酸=3:7（V：V）的，也有的也是这些比例，但用甲醇代替了乙腈，我们这也尝试过几种方式，最后还是觉得乙腈：0.5%冰醋酸=2:8（V：V）这个更理想些，既避免了分离度差的影响和检测时间长的困惑；三是色谱柱的选择，尽量选择耐酸性强一点的色谱柱，VenusilXBPC18(L)(250×46mm，5μm)色谱柱或是Venusil ABS C18(250×46mm，5μm)色谱柱就不错。

    就到此吧，非常感谢大家能认真阅读，希望多提意见，谢谢啦！

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夏天的雪
bingwang228
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2014/10/26 18:14:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如何能保证样品中的待测物质完全被提取出来
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dahua1981
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2014/10/26 19:56:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由bingwang228发表： 如何能保证样品中的待测物质完全被提取出来
不可能百分之百吧
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houjjun
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2014/10/26 22:38:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
如何能保证样品中的待测物质完全被提取出来
可以把样品分成多分，用不同方法处理，看检测结果大不大，如果提取30分钟和40分钟的结果差不多，那30分钟就够了。另外做加标回收有时也能看出
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夏天的雪
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2014/10/27 10:13:33 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:
原文由bingwang228发表： 如何能保证样品中的待测物质完全被提取出来
不可能百分之百吧
很难百分百提取干净，尽量多的提取吧
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夏天的雪
bingwang228
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2014/10/27 10:14:34 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
如何能保证样品中的待测物质完全被提取出来
可以把样品分成多分，用不同方法处理，看检测结果大不大，如果提取30分钟和40分钟的结果差不多，那30分钟就够了。另外做加标回收有时也能看出
试验中也有此类物质的检测，总担心提前不充分，影响检测结果
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ECHO007
v2769262
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2014/10/27 16:35:30 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个方法的快速检测，测一个样品需要多少时间？
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houjjun
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2014/10/27 18:01:32 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
如何能保证样品中的待测物质完全被提取出来
可以把样品分成多分，用不同方法处理，看检测结果大不大，如果提取30分钟和40分钟的结果差不多，那30分钟就够了。另外做加标回收有时也能看出
试验中也有此类物质的检测，总担心提前不充分，影响检测结果
确实有时会有这种现象
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吕梁山
shih20j07
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2014/10/30 11:55:04 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个和药典方法不一样吧
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吕梁山
shih20j07
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2014/10/30 11:55:23 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我以前做过甘草酸
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zdac
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2014/11/1 20:52:16 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
甘草物美价廉的药材
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