主题：【第七届原创】HBeAg预包被板CV检

HBeAg是乙肝e抗原，通常我们说的乙肝3号就是它。健康人在ELISA检测试剂检测中是阴性，下面我们介绍的就是该类试剂盒中预包被板的精密性见，即CV。该指数有衡量预包被板均一性，每孔间差异的作用。为避免广告嫌疑，均挡住了商标，如有漏出，纯属无意。下面先上图说明书









因为是检验半成品CV，所以酶标记物和板条及阳性对照不必使用同一批号。

下面是预包被板



酶标记物



阳性对照



在说明书中可看到阳性对照的OD值在2.0以上，而我们做CV为了保证效果，会采用3倍OD值至8倍OD值的阳性。所以对于阳性对照要稀释，根据以往经验，稀释15-20倍即可。下面就是稀释液，阳性对照阴性对照及酶标记物均采用该稀释液配制。



稀释液是没有颜色的，根据不同的用途，我们会在酶标记物和阳性对照中加入不同的红色素，而在阴性对照中加入绿色素。在这里没用到阴性对照，故未拍摄照片。

下面将稀释后的阳性对照与酶标记物1:1混合均匀。倒在用PE手套盖住的板盖上。有加样槽，我更习惯与板盖。个人喜好而已。



调节加样器至100微升



检查预包被板包装完整性



撕开包装袋，取出板条







观察板孔透光性是否一致且无污迹。

加样



加样过程时刻注意枪头里的液量是否正常。如有气泡，应排净，对于无法排净的更换枪头。

最左侧的有明显气泡，会导致液量不足。

加完96孔后，盖上盖子，放入37℃温箱，孵育30分钟计时。

设置洗板机参数，准备下步洗板显色。



洗6次，8条，每孔350微升。



30分钟后，取出板条，放入洗板机。



洗板结束后，在卫生纸上排干。先每孔加入50微升底物缓冲液后，再每孔加入50微升底物液。



震荡3-5秒后，放入37℃温箱，孵育15分钟。



15分钟后，用排枪加终止液，每孔50微升。



蓝色是未加终止液的，黄色是加入终止液的，终止液本身无色透明。

终止后效果



拿去读数，双波长450nm/620nm。





计算CV。

打印结果。



整板平均OD值0.770；最大OD值0.874,；最小OD值：0.690。

最右侧下面 的就是整板CV，4.55%。要求是15%以内。OK!该项目合格！

把板条放入消毒液进行无害化处理就可以了。