主题:【讨论】有人用过气相毛细管柱做毛细管电泳的吗?

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gy_y_xj
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对于以上问题,一并做个总结:我用rtx-1柱做了试验,规格是0.25mm,0.25um,截取有效长度50厘米,用10mmol/l时,电压加到5kv,电流就高达270uA,而且冲洗时18秒就把小瓶里的溶液全都冲完了,进样时间得放的很短,否则整管都是样品,分析时没有见到样品峰,不知道为什么,样品是羟基酸,整个过程貌似没有明显电渗流,我没做标记,只是看溶液体积变化大概判断的,也可能不对,各位如果没有兴趣就不用试了,似乎意义不大。我最初尝试只是考虑涂层会对分离有益处,另外可能可以提高灵敏度
nini2006
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对于以上问题,一并做个总结:我用rtx-1柱做了试验,规格是0.25mm,0.25um,截取有效长度50厘米,用10mmol/l时,电压加到5kv,电流就高达270uA,而且冲洗时18秒就把小瓶里的溶液全都冲完了,进样时间得放的很短,否则整管都是样品,分析时没有见到样品峰,不知道为什么,样品是羟基酸,整个过程貌似没有明显电渗流,我没做标记,只是看溶液体积变化大概判断的,也可能不对,各位如果没有兴趣就不用试了,似乎意义不大。我最初尝试只是考虑涂层会对分离有益处,另外可能可以提高灵敏度
才5kV,buffer也才10 M,电流怎么就可以达到那么高呢?太奇特了。你把电压降低到一千以下再试试看。另外,涂层毛细管当然不会有电渗流。
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2015/4/14 11:12:56 Last edit by nini2006
gy_y_xj
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原文由nini2006发表:
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对于以上问题,一并做个总结:我用rtx-1柱做了试验,规格是0.25mm,0.25um,截取有效长度50厘米,用10mmol/l时,电压加到5kv,电流就高达270uA,而且冲洗时18秒就把小瓶里的溶液全都冲完了,进样时间得放的很短,否则整管都是样品,分析时没有见到样品峰,不知道为什么,样品是羟基酸,整个过程貌似没有明显电渗流,我没做标记,只是看溶液体积变化大概判断的,也可能不对,各位如果没有兴趣就不用试了,似乎意义不大。我最初尝试只是考虑涂层会对分离有益处,另外可能可以提高灵敏度
才5kV,buffer也才10 M,电流怎么就可以达到那么高呢?太奇特了。你把电压降低到一千以下再试试看。另外,涂层毛细管当然不会有电渗流。
为什么就不知道了,估计是内径大电阻小电流大吧,至于有无电渗流是不是也得考虑涂层属性?
nini2006
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为什么就不知道了,估计是内径大电阻小电流大吧,至于有无电渗流是不是也得考虑涂层属性?


内径是多少呢?你那个0.25um不太可能是内径吗?那也太小了,不太可能,我们用于CE分析的有20 um,那已经是极限了。
涂层当然是要考虑属性的,但气相色谱柱的涂层应该就是要使毛细管内壁钝化。
CEcret
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对于以上问题,一并做个总结:我用rtx-1柱做了试验,规格是0.25mm,0.25um,截取有效长度50厘米,用10mmol/l时,电压加到5kv,电流就高达270uA,而且冲洗时18秒就把小瓶里的溶液全都冲完了,进样时间得放的很短,否则整管都是样品,分析时没有见到样品峰,不知道为什么,样品是羟基酸,整个过程貌似没有明显电渗流,我没做标记,只是看溶液体积变化大概判断的,也可能不对,各位如果没有兴趣就不用试了,似乎意义不大。我最初尝试只是考虑涂层会对分离有益处,另外可能可以提高灵敏度


在你这个实验中,你所采用的毛细管,内径是250um, 0.25um是涂层的膜厚。
250um的内径,在毛细管电泳中,是神一样粗的内径,电流会比50um内径的管大25倍以上。冲洗的时候当然流量也很大。
电泳一般最多用100um内径毛细管(即使这个内径仍然很粗),可惜的是GC柱,这样内径的太少了。
该帖子作者被版主 nini20063积分, 2经验,加分理由:说得好
gy_y_xj
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原文由v2812644发表:
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对于以上问题,一并做个总结:我用rtx-1柱做了试验,规格是0.25mm,0.25um,截取有效长度50厘米,用10mmol/l时,电压加到5kv,电流就高达270uA,而且冲洗时18秒就把小瓶里的溶液全都冲完了,进样时间得放的很短,否则整管都是样品,分析时没有见到样品峰,不知道为什么,样品是羟基酸,整个过程貌似没有明显电渗流,我没做标记,只是看溶液体积变化大概判断的,也可能不对,各位如果没有兴趣就不用试了,似乎意义不大。我最初尝试只是考虑涂层会对分离有益处,另外可能可以提高灵敏度


在你这个实验中,你所采用的毛细管,内径是250um, 0.25um是涂层的膜厚。
250um的内径,在毛细管电泳中,是神一样粗的内径,电流会比50um内径的管大25倍以上。冲洗的时候当然流量也很大。
电泳一般最多用100um内径毛细管(即使这个内径仍然很粗),可惜的是GC柱,这样内径的太少了。
最初真心没考虑过这么多,尝个鲜,也算是给大家一个提醒吧
nini2006
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原文由 CEcret(v2812644) 发表:
在你这个实验中,你所采用的毛细管,内径是250um, 0.25um是涂层的膜厚。
250um的内径,在毛细管电泳中,是神一样粗的内径,电流会比50um内径的管大25倍以上。冲洗的时候当然流量也很大。
电泳一般最多用100um内径毛细管(即使这个内径仍然很粗),可惜的是GC柱,这样内径的太少了。
好吧,内径居然是250 um……
qqqid
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原文由 CEcret(v2812644) 发表:
在你这个实验中,你所采用的毛细管,内径是250um, 0.25um是涂层的膜厚。
250um的内径,在毛细管电泳中,是神一样粗的内径,电流会比50um内径的管大25倍以上。冲洗的时候当然流量也很大。
电泳一般最多用100um内径毛细管(即使这个内径仍然很粗),可惜的是GC柱,这样内径的太少了。


100um内径的气相柱在气相中用的确实少,但是很容易买到,安捷伦的消耗品手册里有,内径更小的50um气相柱也有,无涂层的空柱管也有。
气相的毛细管柱可以定制,你想要什么规格的,联系厂家就行。
ericwong
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如果气相的毛细管柱的内径是100 um的,那么这样的气相毛细管柱和毛细管电泳的毛细管(内径同样为100 um)又能有什么区别呢?
没有装填料的情况下,应该是一样的吧?
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